BIOLOGÍA 

CUADERNO DE PRÁCTICAS 
Curso 2012/13 
 
 
 
 
 
 
 
 
Grado de Farmacia 
 ÍNDICE

Página

Normas para la realización de las prácticas de Biología ............................................................. 1

Práctica 1A: El microscopio ..................................................................................................... 2
1. Material ................................................................................................................................... 2
2. Objetivos de la práctica ........................................................................................................... 2
3. El microscopio ........................................................................................................................ 2
3.1. Microscopio óptico ..................................................................................................... 2
3.1.1. Lentes y desviación de la luz ..................................................................... 2
3.1.2. Microscopio de campo claro ..................................................................... 3
3.1.2.1. Componentes del microscopio de campo claro ................... 3
Microscopio óptico (vista lateral izquierda) ................. 4
Microscopio óptico (vista lateral derecha) ................... 5
3.1.3. Aumento y resolución de un microscopio ................................................. 6
3.1.3.1. Objetivo de inmersión en aceite .......................................... 7
4. Observación al microscopio .................................................................................................... 7
5. Normas generales para la observación de las preparaciones con el
microscopio óptico ...................................................................................................................... 8
Práctica 1B: Aislamiento de microorganismos en zonas transitadas de la Facultad .......... 9
1. Material ................................................................................................................................... 9
2. Objetivos de la práctica ........................................................................................................... 9
3. Los microorganismos en el medio ambiente ........................................................................... 9
4. Lugares y objetos donde se recogerán las muestras ................................................................ 9
5. Procedimiento para la toma de muestra ................................................................................ 10
6. Lectura de las placas ............................................................................................................. 11
Práctica 2: Preparaciones en fresco y tinción simple ........................................................... 12
1. Material ................................................................................................................................. 12
2. Objetivos de la práctica ......................................................................................................... 12
3. Preparaciones “en fresco” ..................................................................................................... 12
3.1. Observación de la movilidad bacteriana entre porta y cubre .................................... 12
3.1.1. Técnica .................................................................................................... 12
4. Recomendaciones generales para realizar una tinción .......................................................... 13
5. Tinción sencilla o simple ...................................................................................................... 14
5.1. Técnica ..................................................................................................................... 14

i
6. Observación de bacterias y células epiteliales en muestras de boca ..................................... 14
6.1. Procedimiento ........................................................................................................... 15
6.2. Resultado .................................................................................................................. 15
7. Observación de bacterias a partir de colonias aisladas crecidas en medio
de cultivo con agar ............................................................................................................... 15
7.1. Procedimiento ........................................................................................................... 15
7.2. Resultado .................................................................................................................. 16
8. Detección de la presencia de bacterias lácticas en muestras de yogur .................................. 16
8.1. Procedimiento ........................................................................................................... 16
8.2. Resultado .................................................................................................................. 16
Práctica 3: Niveles morfológicos de organización y División celular (mitosis) ................... 17
1. Objetivos de la práctica ........................................................................................................... 17
2. Niveles morfológicos de organización .................................................................................... 17
2.1. Nivel 1 – Protofitos .................................................................................................... 17
2.2. Nivel 2 – Talofitos ...................................................................................................... 18
2.3. Nivel intermedio – Briofitos ....................................................................................... 21
2.4. Nivel 3 – Cormofitos .................................................................................................. 21
2.5. Aplicación de los conocimientos adquiridos .............................................................. 22
3. División celular: Mitosis ......................................................................................................... 23
3.1. La mitosis ............................................................................................................................. 23
3.2. Metodología ......................................................................................................................... 24
3.3. Cariotipo y elaboración de un cariograma ........................................................................... 24
3.4. Aplicación de los conocimientos adquiridos ....................................................................... 27
Práctica 4: Morfología y anatomía de Cormofitos ................................................................. 28
1. Objetivos de la práctica ........................................................................................................... 28
2. La raíz ..................................................................................................................................... 30
3. El tallo ..................................................................................................................................... 34
4. La hoja ..................................................................................................................................... 38
5. Adaptaciones del cormo .......................................................................................................... 46
5.1. Adaptaciones de la raíz ............................................................................................... 46
5.2. Adaptaciones del tallo ................................................................................................ 47
5.3. Adaptaciones de las hojas ........................................................................................... 49

ii
 DISTRIBUCIÓN DE LAS PRÁCTICAS POR DÍAS

PRÁCTICA 1A y 1B PRÁCTICA 2 PRÁCTICA 3 PRÁCTICA 4

EL MICROSCOPIO Y PREPARACIONES NIVELES MORFOLOGÍA Y
AISLAMIENTO DE EN FRESCO Y MORFOLÓGICOS DE ANATOMÍA DE
MICROORGANISMOS TINCIÓN SIMPLE ORGANIZACIÓN Y CORMOFITOS
DIVISIÓN CELULAR
- Descripción del
Microscopio.
- Observación de pre-
paraciones de micro-
DÍA 1 organismos, cortes y
tejidos, fijadas y
LUNES teñidas.
- Aislamiento de
microorganismos en
zonas transitadas de la
Facultad.
- Observación de
preparaciones en
DÍA 2 fresco.
- Tinción simple de
MARTES muestras de boca, de
colonias crecidas en
agar y de yogur.
- Observación e identi-
ficación de organis-
mos de los distintos
niveles de organiza-
ción.
DÍA 3 - Realización de
preparaciones de me-
MIÉRCOLES ristemos radicales para
la observación de la
mitosis.
- Estudio del cariotipo
y elaboración de un
cariograma.
- Observación de
diferentes muestras de
raíces, tallos y hojas a
la lupa y el
microscopio para
conocer su morfología
y anatomía.
DÍA 4 - Identificación de
JUEVES diferentes hojas
mediante una clave
dicotómica.
- Observación y
reconocimiento de
distintas adaptaciones
de la raíz, tallo y
hojas.
DÍA 5
EXAMEN
VIERNES

iii
 NORMAS PARA LA REALIZACIÓN DE LAS PRÁCTICAS DE BIOLOGÍA

1. Preste atención a las explicaciones de los profesores antes de comenzar el trabajo de

laboratorio. La mayoría de las veces, sus comentarios son complementarios a la información
que se incluye en el cuaderno. Tome las notas que crea necesarias y, si lo considera oportuno,
realice dibujos que le ayuden a comprender mejor lo explicado.

2. Lea cuidadosamente el cuaderno de prácticas antes de realizarlas y trate de comprender cada

una de ellas. Si tiene alguna duda, pregunte a los profesores.

3. Planifique el trabajo antes de realizarlo. Antes de iniciar una práctica compruebe que dispone
de todo el material necesario.

4. Mantenga la mesa de trabajo libre de objetos personales (ropa, carpetas, bolsos, teléfonos
móviles, etc.). Coloque dichos objetos en las zonas indicadas por los profesores.

5. Utilice siempre bata de laboratorio. La bata protege sus ropas de una contaminación
accidental y de las salpicaduras de los colorantes que se utilizan en el laboratorio o de otros
compuestos.

6. No fume ni ingiera alimentos en el laboratorio. No se aproxime pinzas, lápices, papeles u

otros utensilios a la boca. No beba agua contenida en material del laboratorio.

7. Procure que su zona de trabajo esté lo más limpia posible. Para ello, trabaje siempre sobre
los papeles de filtro dispuestos sobre las mesas. Siéntese para trabajar, saldrá todo mejor.

8. El material de desecho debe disponerse en recipientes adecuados para su posterior

descontaminación y limpieza. Es muy importante que coloque cada tipo de material en su
contenedor (material biológico, líquidos, vidrio, etc.). No debe tirar por el desagüe los
colorantes utilizados en las tinciones sino verterlos en los bidones preparados para tal fin.

9. Tanto en caso de accidente personal (cortes, quemaduras, etc.), como en el caso de rotura de
algún cultivo, caída de éste al suelo o sobre la mesa de trabajo, debe comunicárselo
inmediatamente a los profesores responsables de las prácticas.

10. Al finalizar el trabajo, deje recogido todo el material. Compruebe que quedan cerrados
mecheros, grifos y rotuladores y, por ultimo, cada día, antes de abandonar el laboratorio, es
aconsejable que se lave, cuidadosamente, las manos con jabón.

1
PRÁCTICA 1A: EL MICROSCOPIO

1. Material

- Microscopio.
- Aceite de inmersión (aceite de cedro).
- Solución desengrasante.
- Preparaciones de microorganismos, células y cortes de tejidos, fijadas y teñidas.

2. Objetivos de la práctica

1. Conocer los nombres y la función de cada uno de los componentes del microscopio de campo claro,
así como su manejo.
2. Comprender cómo funciona un microscopio de campo claro.
3. Aprender a enfocar con los dos ojos abiertos puesto que los microscopios son binoculares.
4. Enfocar preparaciones de microorganismos, células o cortes de tejidos, utilizando los objetivos
secos (4X, 10X, 40X).
5. Enfocar preparaciones teñidas de bacterias con el objetivo de inmersión (100X).

3. El microscopio

La Microbiología se ocupa generalmente de organismos tan pequeños que el ojo humano no

los puede ver a simple vista. Debido a la naturaleza de esta disciplina, el microscopio tiene una
importancia crucial; la mayor parte de los conocimientos sobre los microorganismos se han
descubierto con microscopios. Por ello, es necesario comprender cómo funciona un microscopio y
la forma de preparar adecuadamente las muestras para su examen.
Hay dos tipos fundamentales de microscopio: óptico y electrónico. Dentro del primer tipo,
se encuentran entre otros, los microscopios de campo claro, campo oscuro, contraste de fases y
fluorescencia. En las prácticas se utilizará únicamente el microscopio óptico de campo claro.

3.1. Microscopio óptico

Los microscopios creados por los primeros microscopistas

eran todos sencillos, es decir, constituidos por una sola lente,
denominándose por ello microscopios simples. Los microscopios
modernos son todos compuestos, lo que significa que tienen más
de una lente, de manera que la imagen aumentada que forma la
lente del objetivo es ampliada por la lente del ocular.

3.1.1. Lentes y desviación de la luz

Para comprender cómo funciona un microscopio óptico,

es preciso entender la forma en la que las lentes desvían y
enfocan la luz para formar imágenes.
Cuando un rayo de luz pasa de un medio a otro, se
produce el fenómeno conocido como “refracción de la luz”, es
decir, el rayo se desvía en la interfase. Debido a este fenómeno,
cuando introducimos un lápiz en un vaso con agua, da la
impresión de que el lápiz está doblado. Cada medio tiene un
índice de refracción determinado. El índice de refracción es una
medida de la intensidad con que una sustancia disminuye la
2
velocidad de la luz; la dirección y la magnitud de la desviación se determinan por los índices de
refracción de los dos medios que forman la interfase.
Así, cuando la luz pasa del aire al vidrio, un medio con un índice de refracción superior,
disminuye su velocidad y se desvía hacia la
Rayo de luz
normal, una línea imaginaria perpendicular a la Aire
emergente
Vidrio
superficie. A medida que la luz deja el vidrio
para volver al aire, un medio con un índice de Normal
refracción inferior, acelera su velocidad y se Normal
Aire
desvía de la normal. En consecuencia, un prisma n = 1,52

desvía la luz porque la luz incide sobre su Rayo de luz

superficie en ángulo y el vidrio tiene un índice incidente n = 1 (n = índice de refracción)
de refracción diferente al aire.
Las lentes actúan como un conjunto de prismas que funcionan como una unidad. Cuando la
fuente de luz está alejada, de
forma que los rayos de luz
inciden paralelos sobre la
lente, una lente convexa
enfocará estos rayos en un
punto específico, llamado
foco o punto focal (F). La
distancia entre el centro de la lente y el punto focal se Lente 1
denomina distancia focal (f). La potencia de una lente está
F1
relacionada con la distancia focal. Una lente con una distancia
focal corta
Lente Foco o aumentará f1
punto focal
más un Lente 2
objeto que
otra lente F2
F
con una
Distancia focal distancia f2
focal más
f
larga. La lente 1 producirá más aumento.

3.1.2. Microscopio de campo claro

Se denomina así a este microscopio porque

forma una imagen oscura sobre un fondo claro. Está
formado por un cuerpo o soporte de metal compacto,
compuesto por una base y un brazo, donde se fija el
resto de las partes. En la base se sitúa la fuente de luz.
Idealmente, un microscopio debe ser parafocal,
es decir, que mantenga la imagen enfocada al cambiar el
objetivo.

3.1.2.1. Componentes del microscopio de campo claro

Ocular: lente situada cerca del ojo del observador que amplía la imagen del objetivo (10 ó 15
aumentos 10X ó 15X).

Cabezal: contiene los sistemas de lentes oculares; aunque puede ser monocular la mayoría son
binoculares.

3
 Ocular

Cabezal

Portaobjetivos

Objetivos

Brazo
Pinzas

Platina

Condensador
Diafragma
Macrométrico

Micrométrico Tornillo para mover el condensador

Foco (lámpara)

Pie o base

Conexión
eléctrica

Microscopio óptico (vista lateral izquierda)

4
Tornillos para mover las pinzas

Microscopio óptico (vista lateral derecha)

5
Portaobjetivos (revólver): contiene los sistemas de lentes objetivos (de 3 a 5); al girar permite
cambiar los objetivos.

Objetivo: lente situada cerca de la preparación ampliando la imagen de ésta (4X, 10X, 40-45X, 90-
100X).

Platina: lugar donde se deposita la preparación; está situada hacia la mitad del brazo.

Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación, enfocando un cono de
luz sobre el portaobjetos. Se monta dentro o por debajo de la platina y puede ser fijo o ajustarse
verticalmente.

Diafragma: regula la cantidad de luz que entra en el condensador.

Fuente de luz: lámpara o foco que dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

Soporte: mantiene la parte óptica; tiene dos partes, el pie o base y el brazo.

Tornillos de enfoque: de ajuste grueso o macrométrico, que aproxima el enfoque y de ajuste fino o
micrométrico, que consigue nitidez. Los tornillos se sitúan en el brazo y pueden mover la platina
hacia arriba y hacia abajo para enfocar la imagen.

Tornillo para desplazar verticalmente el condensador (en aquellos microscopios que lo

poseen): permite acercar o alejar el condensador de la preparación.

Pinzas: sujeta el portaobjetos.

Tornillos para mover las pinzas: permiten desplazar las pinzas junto con el portaobjetos hacia
adelante, atrás, izquierda o derecha.

3.1.3. Aumento y resolución de un microscopio

El aumento total se calcula multiplicando los aumentos del objetivo y del ocular. Por
ejemplo, un objetivo de 40X y un ocular de 10X dan un aumento de 400. El aumento máximo que
consiguió Leeuwenhoek fue de unos 270.
La resolución o poder de resolución es la capacidad de una lente para separar o distinguir
entre objetos pequeños que están muy próximos.
La distancia mínima (d) entre dos objetos que
permite distinguirlos como entidades separadas, está
determinada por la ecuación de Abbé: d = λ/2 AN, donde λ
es la longitud de onda de la luz empleada y AN es la
apertura numérica.
Al disminuir d, aumenta la resolución y el detalle
con el que se distingue una muestra. La luz del espectro
visible con una longitud de onda menor es la azul (400-500
nm). Normalmente, se emplean microscopios con luz azul o
azul-verdosa (450-530 nm).
La apertura numérica es una característica propia de
la lente y viene definida en función del índice de refracción
del medio en que se encuentra la lente (n) y del ángulo θ,
que se define como la mitad del ángulo del cono de luz que entra en un objetivo, según la fórmula
AN = n sen θ. Como el índice de refracción del aire es 1 y sen θ no puede ser superior a 1 (el
6
máximo de θ es 90º, y sen 90 es 1), ninguna lente que funcione en el aire puede tener una apertura
numérica superior a 1. La única forma de incrementarla por encima de 1 y conseguir una resolución
mayor, es aumentando el índice de refracción del medio (el aire en este caso).

3.1.3.1. Objetivo de inmersión en aceite

Si se sustituye el aire por aceite de inmersión, generalmente aceite de cedro, un líquido

viscoso e incoloro con el mismo índice de refracción del vidrio (1,52), muchos rayos de luz que no
pueden penetrar el objetivo debido a la reflexión y refracción en la superficie de la lente del
objetivo, podrían hacerlo. Con ello se consigue aumentar la apertura numérica y la resolución.
El máximo poder de resolución de un microscopio con un objetivo de inmersión en aceite
(AN = 1,25) y con luz azul (450 nm) sería de 180 nm.
Esto quiere decir que, en el mejor de los casos, un microscopio de campo claro puede
distinguir entre dos puntos separados por,
aproximadamente, 0,2 µm, el tamaño de
una bacteria pequeña (micoplasma).
La distancia de trabajo de un
objetivo es la distancia entre la superficie
frontal de la lente y la superficie del
cubreobjetos o de la muestra cuando está
bien enfocada. Los objetivos con una
apertura numérica y un poder de resolución
elevados tienen distancias de trabajo cortas.
La mayoría de los microscopios ópticos de campo claro actuales consiguen aumentos de
1.000 ó 1.500 con aceite de inmersión. Cualquier aumento superior a éste no ofrece una observación
más detallada. Se podría construir un microscopio óptico para producir un aumento final de
10.000X, pero sería simplemente como aumentar un borrón.
En la siguiente tabla se comparan las propiedades de los objetivos del microscopio de campo
claro:
Objetivo

De rastreo Bajo Gran De inmersión

Propiedad
o lupa aumento aumento en aceite

Aumento X4 X10 X40-45 X90-100

Apertura numérica 0,1 0,25 0,55-0,65 1,25-1,4

Distancia focal (f) 40 mm 16 mm 4 mm 1,8-2 mm

Distancia de trabajo 17-20 mm 4-8 mm 0,5-0,7 mm 0,1 mm

Poder de resolución
con luz azul (450 nm) 2,3 µm 0,9 µm 0,35 µm 0,18 µm

4. Observación al microscopio

El microscopio óptico de campo claro permite examinar los microorganismos sin teñir,
normalmente vivos, en las denominadas preparaciones en fresco, en las que se reduce la
luminosidad del campo de visión para aumentar el contraste, con la ayuda del condensador y el
diafragma, o bien teñidos mediante colorantes, normalmente muertos tras el proceso de fijación, en
lo que se denominan tinciones.
7
5. Normas generales para la observación de las preparaciones con el microscopio óptico

1. Encender el microscopio y colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas.
Con ayuda de los tornillos, desplazar la preparación hasta que la extensión se sitúe en el centro
de la luz concentrada por el condensador.

2. Si se va a observar una preparación teñida, comprobar que el condensador está elevado y el

diafragma abierto. Si se va a observar una preparación en fresco, el condensador debe estar
bajo y el diafragma semicerrado.

3. Como el microscopio es binocular, ajustar la distancia entre ambos oculares de manera que la
visión sea cómoda utilizando ambos ojos. Para compensar las diferencias ópticas entre el ojo
izquierdo y el derecho, girar los oculares hasta que la imagen sea más clara. Se aconseja a
aquellas personas que llevan gafas, se acostumbren a prescindir de ellas para enfocar las
preparaciones.

4. Si va a utilizar el objetivo de inmersión, mirando el microscopio de frente, subir la platina hasta

que el objetivo de inmersión se sumerja en el aceite de cedro y tome contacto con la
preparación. Hay que ser extremadamente cuidadoso al realizar esta operación ya que algunos
microscopios no tienen tope y se puede romper el portaobjetos y dañar la lente del objetivo.

5. Enfocar la preparación bajando lentamente la platina (nunca enfocar subiendo la platina).

Utilizar el tornillo macrométrico para el ajuste grosero (rápido) y llevar la preparación al
enfoque final con el tornillo micrométrico. El micrométrico debe emplearse únicamente para
conseguir nitidez una vez enfocada la preparación con el macrométrico.

6. Visualizar distintos campos de la preparación, hasta encontrar uno que sea adecuado. Observar
cuidadosamente cada preparación realizando las anotaciones y dibujos que considere
necesarios.

7. Una vez finalizada la observación, debe retirarla cuidadosamente y depositarla en la caja

correspondiente.

8. Desconectar el microscopio, limpiar el objetivo de inmersión si lo ha utilizado (y todas las

zonas que hayan quedado manchadas con aceite de inmersión) empleando un papel suave
impregnado en solución desengrasante y cubrir el microscopio con su funda.

8
PRÁCTICA 1B: AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS EN ZONAS TRANSITADAS
DE LA FACULTAD

1. Material

- Placas de Petri con Agar común.

- Hisopos estériles.
- Tubos con solución salina estéril.
- Rotulador.

2. Objetivos de la práctica

1. Aprender técnicas de aislamiento de microorganismos.

2. Poner de manifiesto la presencia de microorganismos en ambientes diversos y objetos inanimados.
3. Observar el crecimiento de los microorganismos en medio de cultivo sólido.
4. Establecer diferencias en cuanto a cantidad de microorganismos presentes en diferentes ambientes u
objetos según el mayor o menor tránsito de personas.
5. Constatar que muchos de los microorganismos que se encuentran sobre objetos inanimados,
proceden de la microbiota humana, especialmente la de la piel.

3. Los microorganismos en el medio ambiente

En sitios con una gran actividad humana, especialmente en aquellos lugares donde se
concentra o transita un elevado número de personas, resulta relativamente fácil detectar la presencia
de microorganismos. Si la búsqueda se realiza a partir de objetos o sitios que son “tocados” por
seres humanos, es muy probable que se puedan detectar y aislar microorganismos que forman parte
de la microbiota humana, ya sea de forma permanente o transitoria.

Se denomina microbiota humana al conjunto de microorganismos que se establecen en

alguna localización del cuerpo humano ya sea de forma permanente, durante muchos meses o años,
o de forma transitoria, durante días, semanas o algunos meses.

No obstante, no todos los microorganismos que se encuentran

formando parte de esta microbiota son capaces de resistir y
multiplicarse en cualquier ambiente, por lo que no siempre es posible
aislarlos.

Algunos de estos microorganismos requieren unas condiciones

de cultivo especiales, bien sea por su dependencia del oxígeno o por su
intolerancia al mismo o por los requerimientos nutritivos que necesitan
para su metabolismo. Sin embargo, muchos de ellos son capaces de
crecer en medios de cultivo sencillos que pueden preparase en cualquier
laboratorio de microbiología básico.

En esta práctica, trataremos de poner de manifiesto la presencia de estos microorganismos

en lugares públicos de la Facultad, especialmente transitados, o en objetos que son utilizados o
“tocados” por muchas personas en un espacio corto de tiempo.

4. Lugares y objetos donde se recogerán las muestras

1. Ascensores (botones de llamada internos y externos).

9
2. Barandillas de los ascensores.

3. Pasamanos de escaleras (de bajada a las

aulas, de bajada a la cafetería, etc.).

4. Fuente de agua potable (botón que se

presiona para la salida del agua).

5. Ordenadores de la planta 1 (ratón,

espaciador del teclado, etc.).

6. Tirador de la puerta de la Biblioteca.

7. Tiradores de las puertas del Departamento

de Microbiología y Parasitología.

5. Procedimiento para la toma de muestra

Los alumnos se dividirán en grupos

de tres personas para colaborar en la toma
de una muestra. Cada grupo dispondrá de
una placa con medio de cultivo estéril, un
tubo con solución salina estéril, un hisopo
también estéril y un rotulador. Se dirigirán
a la zona que les indique el/la profesor/a
encargado/a de las prácticas y tomarán la muestra de la siguiente manera:

1. Una vez en el lugar exacto donde se ha de tomar la muestra, se procederá a destapar el tubo con
solución salina y el hisopo.

2. A continuación, se introducirá el hisopo en la solución salina y se empapará, escurriéndolo

después ligeramente sobre la pared del tubo.

3. Seguidamente, se pasará el hisopo por la superficie elegida, rotando el hisopo por la misma a
medida que se va extendiendo y tomando la muestra.

10
4. Por último, se procederá a sembrar la placa, que será abierta exclusivamente en este momento y
tapada de nuevo en cuanto finalice este proceso. La tapa de la placa debe permanecer siempre en la
mano de uno de los alumnos y sin tocar la parte interna de la misma.

5. Para realizar la siembra

adecuadamente, basta con pasar
el hisopo por la superficie del
agar repetidas veces, rotando el
mismo para descargar toda la
muestra recogida.

Se recomienda realizar
tres siembras (tomando inóculo
una sola vez) rotando la placa 60 grados, aproximadamente cada vez, según indica el esquema.

6. Una vez sembrada, se rotulará la placa en el borde de la base con las

iniciales del nombre y apellidos de alguno de los miembros del grupo a
fin de que pueda ser identificada tras la incubación.

7. Las placas serán incubadas a 37º C durante 24 horas.

6. Lectura de las placas

Transcurrido el periodo de incubación, se observarán las placas detectando la presencia de

colonias o crecimiento de microorganismos.

Es probable la observación de
colonias de bacterias y levaduras y el
crecimiento de hongos.

11
PRÁCTICA 2: PREPARACIONES EN FRESCO Y TINCIÓN SIMPLE

1. Material

- Microscopio.
- Cultivo bacteriano.
- Suspensión de yogur.
- Cristal violeta.
- Asa de siembra estéril.
- Portaobjetos.
- Cubreobjetos.
- Pinzas.
- Bote con agua de grifo.
- Cristalizador y paralelas.
- Aceite de inmersión (aceite de cedro).
- Solución desengrasante.
- Rotulador.

2. Objetivos de la práctica

6. Aprender a montar preparaciones en fresco de bacterias.

7. Enfocar preparaciones en fresco de bacterias con el objetivo 40X.
8. Distinguir el pequeño tamaño de las bacterias (y si es posible su movimiento) en las preparaciones
en fresco en comparación con las preparaciones teñidas.
9. Aprender la técnica de las tinciones mediante el empleo de la tinción simple.
10. Observar bacterias y células epiteliales a partir de una preparación teñida de una muestra de
boca.
11. Observar bacterias a partir de una preparación teñida de una muestra de yogur.

3. Preparaciones “en fresco”

Las preparaciones “en fresco” (sin teñir) se utilizan para la observación de la movilidad
bacteriana, así como para la observación de la morfología de otros microorganismos de mayor
tamaño, tales como levaduras, mohos, protozoos o algas microscópicas.

3.1. Observación de la movilidad bacteriana entre porta y cubre

3.1.1. Técnica

1. Utilizar un cultivo bacteriano líquido.

2. Con la ayuda de un asa de plástico estéril, depositar una gota del cultivo sobre el portaobjetos.
No hacer nunca una extensión, pues las células pueden perder sus flagelos. Evitar las
agitaciones vigorosas de los cultivos.

3. Colocar sobre la preparación un cubreobjetos

perfectamente limpio. Apoyar un lado del
cubreobjetos sobre el portaobjetos. Ir inclinándolo
hacia la preparación hasta dejarlo caer suavemente
sobre la muestra. No comprimir.

4. Inmediatamente, observar con objetivo de 40X (a

12
 veces es conveniente comenzar con un objetivo de menor aumento, 4X ó 10X, y pasar luego al
de 40X). El condensador debe estar bajo y el diafragma semicerrado (al no estar las células
teñidas y debido al poco contraste que hay entre dichas células y el medio, la observación
resulta difícil y un exceso de luz la hace aún más ardua).

5. Si es posible, distinguir el movimiento debido a flagelos (caótico e irregular), del movimiento

debido a las corrientes (todas las células se desplazan en la misma dirección) y del movimiento
browniano que toda partícula de pequeño tamaño presenta cuando se encuentra en suspensión
(movimiento vibratorio e irregular alrededor de un punto).

Al concluir, depositar la preparación en los contenedores destinados al material de vidrio.

4. Recomendaciones generales para realizar una tinción

1. Marcar con un rotulador cada portaobjetos a fin de identificar la tinción. Marcar por el lado
opuesto a la preparación, para evitar que las letras se borren durante la tinción.

2. La extensión se hará directamente de los cultivos líquidos. Con la ayuda de un asa de plástico
estéril, tomar una gota o dos del cultivo líquido y extenderlas sobre la superficie del
portaobjetos. La
extensión debe tener
aproximadamente 1
2
cm . Asa de siembra

3. Dejar secar totalmente las extensiones, preferiblemente a temperatura ambiente.

4. Las células teñidas deben parecerse lo más posible a las vivas. Por ello, deben fijarse. La
fijación es el proceso por el que se conservan y mantienen (fijan) en su posición las estructuras
internas y externas de las células microbianas; además, inactiva enzimas que podrían alterar la
morfología celular y endurece las estructuras celulares
para que no cambien durante el proceso de tinción ni
de observación. Durante la fijación el microorganismo
se destruye y se adhiere (fija) firmemente al
portaobjetos.

5. Existen dos formas de realizar la fijación: mediante

calor (llama de mechero) o con productos químicos.

6. Para fijar una preparación con calor, se pasa el

portaobjetos, por el lado opuesto a la preparación, por
encima de la llama de un mechero. Son suficientes dos
o tres pases rápidos. Para evitar quemaduras se pueden
utilizar las pinzas.

7. Una vez fijada, colocar la preparación en las paralelas sobre el cristalizador. Añadir el colorante
a los portaobjetos de uno en uno.

8. Los colorantes empleados en microbiología tienen dos características en común: poseen grupos
cromóforos (grupos con dobles enlaces conjugados que dan el color) y pueden unirse a las
células mediante enlaces iónicos, covalentes o hidrófobos.

13
9. Los colorantes ionizables se pueden dividir en dos clases en función de su grupo cargado:
básicos (son catiónicos o tienen grupos cargados positivamente por lo que se unirán a
moléculas o estructuras celulares cargadas negativamente como ácidos nucleicos, proteínas, o
la superficie bacteriana). Ejemplos: cristal violeta, azul de metileno, fucsina básica, safranina,
verde malaquita; y ácidos (son aniónicos o poseen grupos cargados negativamente por lo que se
unen a moléculas o estructuras cargadas positivamente). Ejemplos: eosina, rosa de bengala,
fucsina ácida.

10. En la tinción, los colorantes deben

cubrir sólo la superficie de la extensión.
Los lavados con agua (de grifo) deben
ser abundantes. Los secados finales
deben realizarse al aire colocando el
portaobjetos verticalmente (apoyado en
alguna superficie) sobre el papel de
filtro.

11. Comprobar que los rótulos no se han

borrado. Observar al microscopio con
objetivo de inmersión (100X).

5. Tinción sencilla o simple

Se denomina así porque se emplea un único colorante. Permite determinar el tamaño, la

forma y las agrupaciones a las que de lugar la bacteria. También se utiliza para teñir otros
microorganismos o células.

5.1. Técnica

1. Extensión.
2. Desecación.
3. Fijación con calor.
4. Colorante: cristal violeta u otro colorante básico, 1 minuto.
5. Lavado con agua de grifo.
6. Dejar secar y observar al microscopio con objetivo de inmersión (100X).

6. Observación de bacterias y células epiteliales en muestras de boca

En la boca existe una microbiota muy abundante tanto cualitativa como cuantitativamente.
Hay microorganismos en la saliva, en los dientes,
en la lengua, en el paladar, etc. Algunos de estos
microorganismos intervienen en la formación de
la placa dental, produciendo, en ocasiones, caries.
Esto se debe a que tienen la capacidad de
adherirse firmemente al esmalte dental y una vez
que colonizan la superficie del diente son muy
difíciles de erradicar.
Una de estas bacterias, Streptococcus
mutans, se encuentra en la boca de casi todas las
personas y se convierte en un potente inductor de
caries porque degrada la sacarosa de la dieta en Placa dental
glucosa y fructosa. La fructosa la utiliza para su
14
propio crecimiento, pero la glucosa la emplea para sintetizar un polímero (glucano). El glucano
constituye una especie de red o malla que junto con la gran población de bacterias que hay en la
boca y los residuos orgánicos, forman la placa dental que se adhiere tan firmemente a la superficie
de los dientes que la saliva no puede eliminarla.
Por otra parte, como producto final de la fermentación de la glucosa, se forma ácido láctico
que daña el esmalte del diente. Cuando la sacarosa se agota, la saliva neutraliza la acidez, pero si
ésta persiste o es muy frecuente, el daño no puede reparase de forma eficaz y se produce la caries.
Si la caries afecta al interior del diente éste se pudre a menos que se empaste.

6.1. Procedimiento

1. Con la ayuda de un asa de plástico estéril raspar la superficie de los dientes y depositar la
muestra en un portaobjetos. Opcionalmente, se pueden tomar también otros tipos de muestras:
raspado de lengua, raspado del paladar, saliva o raspado de cara interna de las mejillas.

2. Si la muestra es líquida no es necesario añadir agua al portaobjetos. Si no es así, extender la

muestra sobre una gota pequeña de agua (la gota se recoge vertiendo agua del bote sobre el asa
encima del cristalizador).

3. Dejar secar y realizar una tinción simple.

4. Observar al microscopio con objetivo de inmersión (100X).

6.2. Resultado

En la tinción sencilla de la muestra de boca se comprobará la presencia de células epiteliales

y de bacterias (bacilos y cocos).

7. Observación de bacterias a partir de colonias aisladas crecidas en medio de cultivo con

agar.

A partir de las colonias crecidas en las placas de agar común procedentes de las muestras
tomadas de diversos objetos y ambientes de la Facultad, se podrá observar la presencia de bacterias,
ya sean bacilos o cocos, y de la agrupación que forman, si es que presentan alguna en particular
(parejas, tétradas, cadenas).

Es posible también observar la presencia de levaduras, éstas tienen un tamaño superior al de

las bacterias, y de hongos.

7.1. Procedimiento

1. Depositar una gota de agua sobre un portaobjetos.

2. Con la ayuda de un asa de plástico estéril tocar la superficie de una colonia crecida en las placas
de agar y depositar sobre la gota.

3. Extender la muestra realizando círculos con el asa sobre una superficie no superior a un
centímetro cuadrado.

4. Dejar secar y realizar una tinción simple.

5. Observar al microscopio con objetivo de inmersión (100X).

15
7.2. Resultado

Se comprobará la presencia de bacterias (bacilos o cocos), de levaduras o de hongos

(micelios y/o esporas).

8. Detección de la presencia de bacterias lácticas en muestras de yogur

El yogur es una leche fermentada obtenida por la acción de dos bacterias lácticas sobre la
leche, a la temperatura de 45ºC, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus y Streptococcus
thermophilus.

Las características propias del yogur se deben al crecimiento en la leche de estas dos
bacterias, que son responsables de la acidificación del medio, las propiedades organolépticas y el
desarrollo de la textura adecuada.

Según la legislación española (Real Decreto 874/87, de 30 de abril de 1987), y al igual que
ocurre en el resto de Europa, el yogur debe estar producido por L. delbrueckii subsp. bulgaricus y S.
thermophilus, y no es sólo por una cuestión legal, sino porque los compuestos que condicionan el
sabor son el resultado del metabolismo de estos microorganismos sobre la lactosa: la fermentación
láctica homofermentativa, en la que un 90% del producto de la fermentación de la lactosa es el
ácido láctico. A consecuencia de la acidificación de la leche se produce la coagulación (pH 4,6).
Este proceso se detiene por enfriamiento del producto a una temperatura inferior a los 10ºC.

8.1. Procedimiento

1. A partir de una muestra homogeneizada de yogur (presentada en una placa Petri) hacer una
extensión con un asa sobre un portaobjetos.

2. Dejar secar y realizar una tinción simple.

3. Observar al microscopio con objetivo de inmersión (100X).

8.2. Resultado

En la tinción sencilla de la muestra de yogur se comprobará la presencia de Lactobacillus y

Streptococcus, bacilos y cocos en cadena, respectivamente.

16
PRÁCTICA 3: NIVELES MORFOLÓGICOS DE ORGANIZACIÓN Y
DIVISIÓN CELULAR (MITOSIS)

1. OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA:
Conocer la complejidad de los organismos vegetales, desde los más
sencillos, que están formados por una sola célula, hasta los Cormofitos que
son las plantas mas complejas.
Observar los principales tipos morfológicos que existen.
Observar las distintas fases de la mitosis.
Aprender a estudiar un cariotipo y realizar un cariograma.

2. NIVELES MORFOLÓGICOS DE ORGANIZACIÓN

Los organismos vegetales más simples están constituidos por una sola célula (son
unicelulares) y los más complejos por millones de células (son pluricelulares). Entre
unos y otros hay muchos tipos morfológicos, unos son muy sencillos, microscópicos
y normalmente acuáticos y a partir de ellos, y en el transcurso de la evolución, se
han ido complicando hasta formarse otros muchos más complejos, macroscópicos y
terrestres, que son los vegetales superiores (los que normalmente vemos en el
campo o en los jardines).

Vamos a ver dentro de cada uno de los niveles de organización, los principales tipos
morfológicos:

2.1 NIVEL 1 - PROTOFITOS. Organismos generalmente acuáticos, formados por

una sola célula o por varias unidas por una especie de gelatina, donde cada una de las
células funciona independiente de las otras.

Podemos distinguir los siguientes tipos

morfológicos:

A) Unicelulares Procariotas: formados

por una sola célula, sin núcleo, ni
orgánulos citoplasmáticos (cloro-
plastos, mitocondrias, retículo
endoplasmático, etc.).

B) Unicelulares Eucariotas: formados por una sola célula, con núcleo y orgánulos
citoplasmáticos (cloroplastos, mitocondrias, etc.).

17
 C) Cenobios: formados por varias
células unidas por gelatina. Cada
célula funciona independiente del
resto, pudiendo disgregarse.

2.2 NIVEL 2 - TALOFITOS. Organismos más complejos, generalmente acuáticos,

constituidos por 2 ó más células, entre las cuales hay intercambio de sustancias a
través de plasmodesmos, y por ello funcionan todas como una unidad.

Son pues seres PLURICELULARES.

Las células pueden ser todas iguales y
con las mismas funciones o bien están
diferenciadas, unas forman el cuerpo
del organismo (células vegetativas) y
otras se especializan en la reproducción
(células reproductoras). Generalmente
al cuerpo de estos organismos se le
llama TALO.

18
Podemos distinguir los siguientes tipos morfológicos:

D) Colonias: formadas por 2 a 50.000 células. Pueden ser planas o esféricas. Son
microscópicas.

E) Filamentos celulares tabicados y

simples: cadenas de células situadas unas a
continuación de otras, todas en un plano.
Son microscópicos.

F) Filamentos celulares tabicados y ramificados: Son cadenas de células en

un plano, de las que salen cadenas laterales. Son microscópicos.

G) Filamentos cenocíticos o sifonados: Son como

tubos alargados con muchos núcleos, cada uno de
ellos tiene sus correspondientes orgánulos
citoplasmáticos, pero no hay tabiques que los
separen. Son planos y pueden ser simples o
ramificados. Son microscópicos.

19
H) Láminas u organismos laminares:
organismos planos formados por muchos
filamentos celulares paralelos y unidos
lateralmente. Son microscópicas o
macroscópicas.

I) Plecténquima: organismos con distintas formas, con volumen, formados

por filamentos dispuestos en las tres direcciones del espacio, entrelazados y
unidos por una sustancia compactante. Son macroscópicos.

J) Pseudoparénquima: organismos más complejos, con distintas formas, con

volumen, formados por filamentos dispuestos en las tres direcciones del espacio,
entrelazados y soldados por las paredes celulares. Tienen siempre las células
diferenciadas en C. vegetativas y C. reproductoras. Además en las C. vegetativas
aparece otra diferenciación celular, las células externas son de pequeño tamaño,
tienen las paredes muy gruesas y son protectoras y las células internas son de
mayor tamaño y acumulan sustancias de reserva. Son macroscópicos.

20
 K) Talos Hísticos: son los talofitos más complejos
que existen. Pueden tener distintas formas, son
organismos con volumen, formados por muchas
células dispuestas en las tres direcciones del
espacio que todas se forman por división de una o
varias células iniciales y están diferenciadas en C.
vegetativas y C reproductoras. Las C. vegetativas
están diferenciadas en varios tipos distintos, células
protectoras, células de almacenamiento, y a veces
también células conductoras. Externamente están
divididos en tres partes, una que esta dentro del
substrato y ancla el organismo que son los
RIZOIDES (formados por una célula o por un
filamento de células), y dos partes fuera del substrato,
el CAULOIDE que es más o menos cilíndrico y el
FILOIDE que es aplanado y está a continuación del
cauloide. Son macroscópicos.

2.3 NIVEL intermedio entre Talofitos y

Cormofitos (los veremos a continuación) -
Filidios
BRIOFITOS. Organismos terrestres, pluricelulares,
de pequeño tamaño, macroscópicos. Son muy
parecidos a los talos hísticos en cuanto a
constitución, diferenciación celular y forma externa.
Externamente también están divididos en tres parte:
RIZOIDES (formados por una célula o por un
filamento de células) que sirven para sujetarse al
substrato, CAULIDIO parte cilíndrica y aérea sobre
Caulidio la que se disponen los FILIDIOS (estructuras
planas, verdes, formadas por una capa de células).
Rizoides También al cuerpo de estos organismos se le llama
TALO.

2.4 NIVEL 3 - CORMOFITOS. Organismos terrestres, pluricelulares, de tamaños

diferentes (hasta de más de 100 m de longitud), macroscópicos, con volumen, que
están divididos externamente en tres ÓRGANOS: RAÍZ, TALLO Y HOJA. Estos
tres órganos constituyen el CORMO. La raíz es un órgano vegetativo y subterráneo,
sirve para anclar la planta y absorber agua y sales minerales del suelo. El tallo es un
órgano vegetativo y aéreo, sostiene las hojas, normalmente se divide en ramas,
algunas de ellas se especializan en la reproducción (FLORES). Las hojas son
vegetativas y planas, realizan la fotosíntesis y la transpiración. Estos tres órganos
están formados por TEJIDOS.

21
 UN TEJIDO es un conjunto de células que tienen una morfología
definida y una función especial

Estos organismos presentan dos grandes grupos de tejidos: Los Meristemos o

Tejido meristemático (que se encuentran en el ápice de la Raíz y del Tallo) y
los Tejidos Adultos (que forman el resto de la raíz, tallo y hoja). Los
Meristemos están formados por células vivas, más o menos esféricas, pequeñas,
de paredes delgadas, situadas unas al lado de otra, con núcleos grandes, que
tienen gran capacidad de división. Al dividirse cada una de las células
meristemáticas por mitosis, forman 2 células hijas, una sigue meristemática y la
otra se diferencia (adquieren otra forma y una función especifica) y constituyen
los tejidos adultos. Estos Tejidos Adultos están formados por células vivas o
muertas, poliédricas, grandes, con paredes normales o gruesas y están separadas
dejando entre ellas espacios intercelulares. Las células de los tejidos adultos se
dividen poco o no se dividen.
Los principales tejidos adultos son: el tejido fundamental o PARÉNQUIMA
que forma la mayor parte de los tres órganos; Los tejidos PROTECTORES
que recubren cada uno de los órganos; los tejidos CONDUCTORES (Floema
y Xilema) que transportan sustancias desde la raíz hasta las hojas y viceversa;
los tejidos MECÁNICOS o de SOSTÉN que dan consistencia y resistencia al
vegetal.

2.5 APLICACIÓN DE LOS CONOCIMIENTOS ADQUIRIDOS

Analizar las muestras 1-11 y decir de cada una de ellas: si son
microscópicas o macroscópicas, unicelulares o pluricelulares, si son planos
o tienen volumen, el nivel de organización al que pertenecen y el tipo
morfológico de organismo.

22
 3. DIVISIÓN CELULAR: MITOSIS

¿En qué células se pueden observar la mitosis?

En las células de los meristemos (tejidos

de crecimientos) que tienen una alta
capacidad de dividirse mediante mitosis.
Como se ha mencionado anteriormente,
estos tejidos están formados por células
isodiamétricas con paredes delgadas,
núcleos grandes, nucleolos bien
desarrollados y orgánulos citoplasmático
poco diferenciados.

3.1 LA MITOSIS
Es la división del núcleo que origina dos núcleos hijos idénticos genéticamente,
e iguales al núcleo de la célula original. A continuación se divide el citoplasma, por
lo que se obtienen dos células.

23
 3.2 METODOLOGÍA

Vais a realizar una preparación utilizando meristemos apicales de

raíces de Allium cepa (cebolla). Una vez realizada deberéis buscar e
identificar células en las distintas fases de la mitosis. Para ello deberéis
seguir los siguientes pasos:
1.-Teñir varias raíces con Carmín nacarado
2.- Cortar 2 mm de una raíz sobre un portaobjetos
3.- Inmediatamente poner una gota de ácido acético al 45%
4.- Colocar encima un cubreobjeto
5.- Calentar en la bombilla del flexo sin sobrepasar los 37ºC (repetir varias veces)
6.- Con cuidado, golpear sobre la preparación con un palillo
7.- Eliminar el exceso de ácido acético con papel de filtro
8.- Observación al microscopio
Aunque la mayoría de las células estarán en interfase, busca e identifica
las restantes fases de la mitosis

PROFASE METAFASE ANAFASE TELOFASE

3.3 CARIOTIPO Y ELABORACIÓN DE UN CARIOGRAMA

El CARIOTIPO es el conjunto de cromosomas que tienen los núcleos

somáticos de las células de una planta (en plantas superiores son diploides).

Para el estudio del cariotipo y la elaboración de un cariograma se deben

examinar los cromosomas con más detalle.

24
 Partes de un cromosoma

Satélites

Brazo corto ADN

BC
Centrómero

Brazo largo
BL

Cromátidas

En el estudio del cariotipo de una especie determinada hay que tener en cuenta:

Número de cromosomas (hay que contarlos en varias células y asegurarse de que

es constante.
Tamaño de los cromosomas.
Morfología. La forma se define por la posición del centrómero que divide al
cromosoma en dos partes o brazos que pueden ser iguales o desiguales. Si los dos
brazos son más o menos iguales porque el centrómero esté situado en la región
mediana se les llama METACÉNTRICOS (la relación entre los brazos es de 1-
1,7); si el centrómero está en la región submedia, SUBMETACÉNTRICOS (la
relación entre los brazos varía entre 1,8 y 3); si el centrómero está en la región
subterminal, SUBTELOCÉNTRICOS (la relación entre los brazos es de 3,1-7); y
si el centrómero está en la región terminal TELOCÉNTRICOS (la relación entre
los brazos es mayor de 7).

Submetacéntrico (sm) Subtelocéntrico (st) Telocéntrico (t)

Metacéntrico (m)
3,1 – 7 >7
1,8 – 3
1 – 1,7

25
 Presencia o ausencia de estrechamientos o constricciones en los cromosomas y
la posición dentro del cromosoma. A veces una porción del cromosoma está
separada del resto por un filamento más o menos largo de ADN, a esta porción
se le llama SATÉLITE.

Asimetría del cariotipo. Depende simultáneamente del tamaño y la morfología

de los cromosomas. Cuando todos los cromosomas son más o menos del mismo
tamaño y predominan los cromosomas metacénticos o submetacénticos, se dice
que el cariotipo es simétrico. Si por el contrario hay diferencia en el tamaño de
los cromosomas y hay predominio de cromosomas telocéntricos o
subtelocéntricos, se dice que el cariotipo es asimétrico.

EJEMPLO DE LA ELABORACIÓN DE UN CARIOGRAMA

Una vez que se ha verificado que el número de cromosomas es igual en todas las
células examinadas, se procederá a la elaboración del cariograma.

1.- Numerar cada cromosoma por detrás

POR DETRÁS

2.- Medir con un trozo de papel milimetrado o con una regla los brazos largos
(BL) y cortos (BC) de todos los cromosomas, y se elabora una tabla añadiendo la
longitud total (LT), la relación brazo largo/brazo corto (BL/BC) y el tipo de
cromosoma (m, sm, st, t). El satélite (en el caso que aparezca) no contabilizará en
la medida del cromosoma.

LT BL BC BL/BC Tipo
1 21 13,5 7,5 1,8 sm
2 57 30 27 1,1 m
3 54 30 24 1,3 m
4 54 31 23 1,4 m
5 59 31 28 1,1 m
6 32 27 5 5,4 st
7 32 25 7 3,6 st
8 22 15 7 2,1 sm

26
 3.- Recortar cada cromosoma

4.- Emparejar cada cromosoma teniendo en cuenta la longitud total de los

cromosomas y el tipo (m, sm, st, t).
Parejas de cromosomas
LT BL BC BL/BC Tipo
1 21 13,5 7,5 1,8 sm
2 57 30 27 1,1 m
3 54 30 24 1,3 m
4 54 31 23 1,4 m 1–8 6-7
5 59 31 28 1,1 m
6 32 27 5 5,4 st
2–5 3–4
7 32 25 7 3,6 st
8 22 15 7 2,1 sm

5.- Alinear las parejas de cromosomas por el centrómero, empezando por la

pareja más grande hasta la más pequeña (independientemente del tipo de
cromosoma). Siempre se pone el brazo largo hacia abajo.

6.- Poner de forma abreviada el tipo de cromosoma debajo de cada pareja. Los
satélites se indican con superíndices.

m msat st sm

Por lo tanto, un cariograma es la disposición ordenada (de mayor a menor) de los

cromosomas emparejados que se obtiene con el estudio del cariotipo.

3.4. APLICACIÓN DE LOS CONOCIMIENTOS ADQUIRIDOS

Realiza el estudio del siguiente cariotipo y elabora su correspondiente
cariograma siguiendo las indicaciones anteriores.

27
PRÁCTICA 4: MORFOLOGÍA Y ANATOMÍA DE CORMOFITOS

1. OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
Conocer qué es un Cormofito y qué grupos de plantas incluye.

Familiarizarse con la morfología y anatomía de los órganos característicos

de los Cormofitos (raíz, tallo y hojas).

Comprender la utilidad de los caracteres morfológicos y anatómicos en la

identificación de plantas.

Iniciar el manejo de claves dicotómicas utilizando los caracteres aprendidos.

Reconocer diversas adaptaciones de la raíz, el tallo y las hojas, así como

comprender su finalidad.

Como se ha indicado en la práctica anterior, los Cormofitos son aquellos vegetales que
generalmente tienen una parte subterránea (raíz), y una parte aérea diferenciada en tallo
y hojas. Estos tres órganos están formados por distintos tipos de tejidos especializados.
Además, la raíz, el tallo y/o las hojas pueden sufrir modificaciones dependiendo de las
condiciones en las que vivan estas plantas.

28
 En los Cormofitos se agrupan los helechos y las plantas con semillas.

CORMOFITOS

Helechos Plantas con semillas

(Pteridofitas y plantas afines) (Espermatofitas)

Gimnospermas Angiospermas

Monocotiledóneas Dicotiledóneas

29
 2. LA RAÍZ (MESA 1)

La raíz fija la planta al substrato, y absorbe agua y substancias nutritivas

disueltas que serán transportadas por toda la planta.

2.1. MORFOLOGÍA
Lo habitual, es que crezca bajo el suelo, y desde un punto de vista
morfológico, se pueden diferenciar dos tipos de raíces:

Axonomorfa: Constituida por una raíz principal bien desarrollada, a partir de la

cual se producen raíces laterales o secundarias más pequeñas. Es típica de
Dicotiledóneas y Gimnospermas.
Fasciculada: Constituida por numerosas raíces, más o menos de la misma longitud
y grosor, que se originan en la parte inferior del tallo. Es típica de
Monocotiledóneas.

En la muestra 1 y 2 se observan estos dos tipos de raíces. Especifica cuál es

cada una y realiza un esquema de ellas.

Muestra 1: Muestra 2:

2.2. ANATOMÍA Muestra 3: Observa al microscopio el

corte longitudinal del extremo de una
En una raíz típica se observan las raíz. Identifica las tres zonas señaladas.
siguientes partes:

30
Si se da un corte transversal a una raíz típica con crecimiento primario se
pueden observar los tejidos que la forman y cómo se disponen.

Como se puede observar a continuación, la estructura primaria de una raíz de

dicotiledónea y la de una monocotiledónea presentan algunas diferencias.

CORTE TRANSVERSAL DE UNA RAÍZ PRIMARIA DE UNA DICOTILEDÓNEA

Endodermis (Tejido protector). Es común en Parénquima cortical (Tejido

órganos subterráneos. Está formada por una capa parenquimático). Es el tejido
de células vivas pequeñas que presentan paredes localizado entre la epidermis y la
gruesas (Bandas de Caspary). Esta capa aísla la endodermis. Está formada por
zona exterior de la raíz de la zona interior. numerosas capas de células vivas
más grandes y de paredes
delgadas.

Epidermis (Tejido protector).

Es la capa más externa, formada
Xilema (Tejido conductor). Está
por células vivas pequeñas de
formado por células muertas más
paredes delgadas.
grandes y de paredes gruesas que se
encargan de transportar el agua y las
sales minerales.
Floema (Tejido conductor). Está
formado por células vivas pequeñas de
paredes delgadas que se encarga de
transportar las sustancias elaboradas en
la fotosíntesis.

31
 CORTE TRANSVERSAL DE UNA RAÍZ PRIMARIA DE UNA
MONOCOTILEDÓNEA

Endodermis (Tejido protector). Es Parénquima cortical (Tejido

común en órganos subterráneos. Está parenquimático). Es el tejido
formada por una capa de células vivas localizado entre la epidermis y la
pequeñas que presentan paredes gruesas endodermis. Está formada por
(Bandas de Caspary). Esta capa aísla la zona numerosas capas de células vivas
exterior de la raíz de la zona interior. más grandes y de paredes
delgadas.

Epidermis (Tejido protector).

Es la capa más externa, formada Xilema (Tejido conductor). Está
por células vivas pequeñas de formado por células muertas más
paredes delgadas. grandes y de paredes gruesas que se
encargan de transportar el agua y las
sales minerales.

Médula (Tejido parenquimático). Floema (Tejido conductor). Está

Es el tejido fundamental que está formado por células vivas pequeñas de
formado por numerosas capas de paredes delgadas que se encarga de
células vivas de paredes delgadas que transportar las sustancias elaboradas en
pueden acumular sustancias de reserva. la fotosíntesis.
Este tejido puede terminar
desapareciendo.

32
Muestra 4: Observa el corte transversal de la raíz con crecimiento primario que está
en el microscopio. Identifica los tejidos que la forman con ayuda del esquema
anterior y señálalos en la siguiente fotografía. Indica si pertenece a una dicotiledónea
o monocotiledónea.

Muestra 5: Observa el corte transversal de la raíz con crecimiento primario que está
en el microscopio. Identifica los tejidos que la forman con ayuda del esquema
anterior y señálalos en la siguiente fotografía. Indica si pertenece a una dicotiledónea
o monocotiledónea.

33
Indica la diferencia entre el corte transversal de la raíz primaria de una
dicotiledónea y la de una monocotiledónea.

3. EL TALLO (MESA 2)

3.1. MORFOLOGÍA

El tallo, generalmente es la parte

aérea de la planta que sirve de
entrenudo
soporte a hojas, flores y frutos, y
permite la conducción del agua y las
sales minerales procedentes de la nudos
raíz, así como los productos
sintetizados tras la fotosíntesis en las
partes verdes. En él se diferencian
nudos (punto en el que se insertan
las hojas) y entrenudos (zona
situada entre cada dos nudos). Tallo

Los tallos de las plantas arbóreas y arbustivas son leñosos (duros),

mientras que los de las plantas herbáceas son blandos y verdes. Aunque
los tallos son generalmente cilíndricos, también se pueden encontrar de
sección cuadrada o triangular.

Muestra 6 (A-C): Indica en cada caso si el tallo es herbáceo o leñosos y su sección

(cilíndrico, cuadrado o triangular).

6A:
6B:
6C:

34
 3.2. ANATOMÍA

Si se da un corte transversal a un tallo típico con crecimiento primario se

pueden observar los tejidos que la forman y cómo se disponen.

Como se puede observar a continuación, la estructura primaria de un tallo de

dicotiledónea y el de una monocotiledónea presentan algunas diferencias.

CORTE TRANSVERSAL DE UN TALLO PRIMARIO DE UNA DICOTILEDÓNEA

Epidermis (Tejido protector). Es

la capa más externa, formada por
células vivas pequeñas de paredes
delgadas. Esclerénquima (tejido
mecánico). Está formado por
células muertas pequeñas con
paredes muy gruesas.

Floema (Tejido conductor).

Formado por células pequeñas
de paredes delgadas que se
encargan de transportar las
sustancias elaboradas en la
Colénquima (tejido mecáni- fotosíntesis.
co). Está formado por varias
capas de células pequeñas de
paredes, aunque algo más Xilema (Tejido conductor).
gruesa que en la epidermis. Formado por células más
grandes y de paredes gruesas
que se encargan de transportar
el agua y las sales minerales.

Parénquima (Tejido parenquimá-

tico). Es el tejido fundamental donde
se encuentran los elementos
conductores. Está formado por
numerosas capas de células vivas más
grandes y de paredes delgadas.

35
 CORTE TRANSVERSAL DE UN TALLO PRIMARIO DE UNA
MONOCOTILEDÓNEA

Epidermis (Tejido protector).

Es la capa más externa, formada
por células vivas pequeñas y
paredes delgadas.
Esclerénquima (tejido
mecánico). Está formado
por células muertas
pequeñas con paredes muy
gruesas.

Floema (Tejido conductor).

Está formado por células vivas
pequeñas de paredes delgadas
que se encarga de transportar
las sustancias elaboradas en la
fotosíntesis.
Colénquima (tejido
mecánico). Está formado
por varias capas de células
vivas pequeñas y con las Xilema (Tejido conductor).
paredes algo más gruesa que Está formado por células
en la epidermis. muertas más grandes y de
paredes gruesas que se
encargan de transportar el
agua y las sales minerales.

Parénquima (Tejido paren-

quimático). Es el tejido donde se
encuentran los elementos
conductores. Está formado por
numerosas capas de células vivas
más grandes y de paredes
delgadas.

36
Muestra 7: Observa al microscopio el corte transversal de un tallo con crecimiento
primario. Identifica los tejidos que la forman con ayuda del esquema anterior y
señálalos en la siguiente fotografía. Indica si se trata del tallo de una
monocotiledónea o de una dicotiledónea.

Muestra 8: Observa al microscopio el corte transversal de un tallo con crecimiento

primario. Identifica los tejidos que la forman con ayuda del esquema anterior y
señálalos en la siguiente fotografía. Indica si se trata del tallo de una
monocotiledónea o de una dicotiledónea.

37
 Indica las diferencias entre el corte transversal del tallo primario de una
monocotiledónea y el de una dicotiledónea.

4. LA HOJA (MESA 3)
Las hojas son órganos laminares, generalmente especializados en la función
fotosintética y en la respiración.

4.1. MORFOLOGÍA

ÁPICE

BASE

La cara superior de la hoja es el haz y la inferior es el envés. El limbo es la parte

laminar de la hoja, y el eje que lo une al tallo es el pecíolo. A veces, en la base del
pecíolo aparecen unas pequeñas piezas que se denominan estípulas. Las hojas que
tienen pecíolos son hojas pecioladas, pero si carecen de el son hojas sésiles o
sentadas.

Hoja peciolada Hoja sentada

38
 Disposición de las hojas en el tallo

Muestra 9 (A-E): Indica en cada caso la disposición de las hojas en cada uno de
los tallos.

9A:
9B:
9C:
9D:
9E:

Las hojas son simples, cuando constan de una sola lámina foliar, o compuestas,
cuando la lámina foliar se divide en varias subunidades llamadas folíolos (todos los
folíolos están en el mismo plano).

Folíolos

Hojas simples Hojas compuestas

39
Existen muchos tipos de hojas simples atendiendo a su forma, margen, ápice,
base, etc.

40
Los caracteres dados anteriormente para las hojas simples se pueden aplicar a los
folíolos de las hojas compuestas.
Tipos de hojas compuestas

Nerviación de la hoja
Los nervios que atraviesan las hojas, además de proporcionar cierta rigidez, se
encargan de conducir el agua y las sustancias nutritivas. A continuación se
indican algunos tipos de hojas atendiendo a la disposición de sus nervios.

41
 ACTIVIDAD 1. A continuación se pueden observar diferentes tipos de hojas.
Completa los siguientes recuadros. Si la hoja es compuesta especifica el tipo.

Forma
Tipo de hoja

Ápice
Apice
Ápice

Base Base

Base

42
 Nerviación Nerviación

Margen

Tipo de hoja

Margen del foliolo Tipo de hoja

Forma de los foliolos basales

Forma de la hoja

Ápice

Margen

Nerviación

43
ACTIVIDAD 2. Identificación mediante una clave dicotómica
de las muestras 10A-Ñ
A continuación se aplicarán los conocimientos adquiridos sobre la morfología de
la hoja identificando distintos tipos de hojas mediante una clave dicotómica.

CLAVE
1.- Hoja compuesta ··································································································2
1.- Hoja simple·········································································································4
Muestra
2.- Folíolos con margen entero ···············································································G
2.- Folíolos con margen de otra forma····································································3
Muestra
3.- Hoja imparipinnada ··························································································· B
Muestra
3.- Hoja digitada······································································································· J

Muestra
4.- Hojas escuamiformes·························································································D
4.- Hojas de otro tipo ·······························································································5

Muestra
5.- Hoja acicular······································································································H
5.- Hoja no acicular··································································································6

Muestra
6.- Hoja con estípulas·······························································································F
6.- Hoja sin estípulas································································································7

Muestra
7.- Hoja con nerviación palmeada ········································································· M
7.- Hoja con otro tipo de nerviación ········································································8

Muestra
8.- Hoja falcada·········································································································I
8.- Hoja de otra forma······························································································9
Muestra
9.- Hoja paralelinervia ····························································································K
9.- Hoja con nerviación pinnada ············································································10

Muestra
10.- Hoja sentada ···································································································· L
10.- Hoja peciolada ································································································11

Muestra
11.- Hoja con margen lobulado··············································································· C
11.- Hoja con margen no lobulado·········································································12
Muestra
12.- Hoja deltoide····································································································Ñ
12.- Hoja de otra forma··························································································13

Muestra
13.- Hoja con la base cordada ·················································································A
13.- Hoja con la base de otra forma ·······································································14
Muestra
14.- Hoja con margen serrado·················································································N
14.- Hoja con margen entero···················································································
Muestra E

44
 4.2. ANATOMÍA
Al igual que en la la raíz y el tallo, al dar un corte transversal a una hoja
típica se pueden observar observar los tejidos que la forman.
Epidermis superior (Tejido Cutícula capa delgada que está
protector). Es la capa más compuesta de una sustancia denominada
externa, formada por células vivas cutina segregada por las células de la
pequeñas y paredes delgadas. epidermis.

Parénquima en empalizada
(Tejido parenquimático). Capa de
células vivas alargadas con muchos
cloroplastos y que se disponen muy
juntas.
Parénquima esponjoso (Tejido
parenquimático). Varias capa de
células vivas poligonales con
mucho espacio entre ellas.

Epidermis inferior (Tejido

protector)
Floema (Tejido conduc-
tor). Formado por células
Xilema (Tejido conductor). vivas pequeñas de paredes
Células oclusivas. Pareja Formado por células muertas delgadas que se encarga de
de células vivas que forman más grandes y de paredes transportar las sustancias
el estoma gruesas que se encargan de elaboradas en la fotosíntesis.
transportar el agua y las sales
minerales.

Muestra 11: Observa al microscopio el corte transversal de una hoja típica de

Dicotiledónea. Identifica los tejidos que la forman con ayuda del esquema anterior y
rotula la siguiente fotografía.

45
 Muestra 12: Estomas en la epidermis de
Carpobrotus.
Ostíolo
Para ver los estomas separa una lámina de la
epidermis de Carpobrotus, y colócala sobre el
portaobjeto con una gota de agua destilada, con la
cara interna de la epidermis hacia arriba.
Células Ahora coloca encima un cubreobjeto y reconoce
los estomas en el microscopio usando el objetivo
oclusivas
de x10 y x40. Realiza un esquema localizando las
células oclusivas y el ostíolo.

5. ADAPTACIONES DEL CORMO (MESA 4)

Las distintas partes del cormo (raíz, tallo y hojas) pueden presentar diversas
modificaciones para adaptarse al lugar en el que viven o bien a unas
determinadas condiciones ambientales.

5.1. ADAPTACIONES DE LA RAÍZ

Aunque lo normal es que la raíz sea un órgano subterráneo con la morfología
observada en las muestras 1 o 2, a veces puede presentar otro aspecto debido a que
la planta necesite adaptarse a una determinada situación.

5.1.1. Raíces que acumulan sustancias de reserva para pasar una época
desfavorable.

A) Raíces napiformes

Son raíces principales engrosadas,

aunque es frecuente que también
forme parte la zona inferior del tallo.

B) Raíces tuberosas

Son raíces subterráneas engrosadas que se

parecen a los tubérculos caulinares.

46
5.1.2. Raíces que ayudan a la planta a disponer de mayor cantidad de
luz para la fotosíntesis.

A) Raíces adhesivas
Son raíces aéreas que se pegan a un soporte vertical
para alcanzar zonas mejor iluminadas.

5.1.3. Raíces para absorber la humedad atmosférica.

A) Raíces aéreas
Son raíces aéreas características de
las plantas que viven sobre otros
vegetales por lo que absorben el
agua y los nutrientes de la lluvia.

5.1.4. Raíces con función de sostén.

A) Raíces fúlcreas

Son raíces gruesas que se forman

en los nudos basales y penetran en
el suelo donde cumplen una doble
función :sostén y absorción.

5.2. ADAPTACIONES DEL TALLO

Aunque las funciones del tallo son sostener las ramas, hojas, flores y frutos, así
como conducir la savia bruta y elaborada, en ocasiones se adapta para favorecer
la fotosíntesis, actúa como órgano de reserva acumulando sustancias elaboradas
o simplemente agua, o puede actuar como órgano de multiplicación.

5.2.1. Tallos subterráneos que acumulan sustancias de reserva para pasar

una época desfavorable.
A) Rizomas
Son tallos subterráneos que pueden
crecer de forma indefinida paralelos al
sustrato.

47
 B) Tubérculos caulinares
Son tallos subterráneos de
crecimiento limitado y generalmente
más grueso que los rizomas. Además
de acumular reservas permiten la
multiplicación de la especie.

5.2.2. Tallos que acumulan agua

A) Tallos carnosos, crasos o suculentos

Son tallo aéreos de aspecto carnoso
que muestran algunas plantas al
almacenar agua en su tejido
parenquimático.
A veces el agua se almacena en la
base del tallo.

5.2.3. Tallos o ramas que ayudan al la planta a disponer de mayor

cantidad de luz para la fotosíntesis.

A) Zarcillos caulinares
Son tallos que se hacen delgados, a modo de
hilos, capaces de rodear cualquier soporte para
alcanzar zonas mejor iluminadas.

B) Tallos o ramas aplanados

Son típicos de plantas con hojas muy

reducidas (escamas o espinas) que aplastan
sus tallos, dándoles incluso aspecto de
hojas, con el fin de aumentar la superficie
por donde realizar la fotosíntesis.

C) Tallos o ramas volubles

Son tallos flexibles que se enrollan en algún soporte .

48
 5.2.4. Tallos adaptados a la multiplicación.

A) Estolones

Son brotes laterale que nace en la base del tallo que crecen horizontalmente al
sustrato, y que son capaces de enraizar y originar un nuevo individuo .

5.3. ADAPTACIONES DE LAS HOJAS

5.3.1. Hojas que acumulan agua o minimizan su pérdida

* Hojas carnosas, crasas o suculentas

Son hojas de aspecto carnoso que muestran algunas plantas al
almacenar agua en el tejido parenquimático de las hojas.

* Hojas reducidas a espinas

Las espinas son formaciones rígidas, ricas en tejidos de sostén,
que disminuyen la pérdida de agua, e incluso pueden ayudar a la
absorción del rocío y de la niebla como en el caso de los cactus.
No hay que confundir estas espinas con las que desarrollan
otras plantas para defenderse de los herbívoros.

5.3.2. Hojas que acumulan sustancias de reserva para pasar una época
desfavorable.

*Bulbo
Son tallos subterráneos muy cortos y rodeados de hojas
gruesas (no verdes) ricas en materia de reserva.

5.3.3. Hojas que contribuyen a disponer de mayor cantidad de luz para la

fotosíntesis.
* Zarcillos foliares
Son hojas o partes de éstas que se hacen delgadas, a
modo de hilos, capaces de rodear cualquier soporte para
alcanzar zonas mejor iluminadas.

49
5.3.4. Hojas adaptadas a condiciones anormales de nutrición

* Hojas trampas
Son típicas de plantas que viven en lugares pobres en
nitrógeno. Para compensar esta carencia suelen transforman
sus hojas en trampas para capturar pequeños insectos que
utilizarán como fuente suplementaria de nitrógeno.

ACTIVIDAD 3. Indica en cada muestra el tipo de adaptación y para

que sirve. Fíjate que en algunas plantas se modifica más de un órgano.
Indícalo cuando ocurra.
Muestra 13…………………………………………………………………
Muestra 14…………………………………………………………………
Muestra 15…………………………………………………………………
Muestra 16…………………………………………………………………
Muestra 17…………………………………………………………………
Muestra 18…………………………………………………………………
Muestra 19…………………………………………………………………
Muestra 20…………………………………………………………………
Muestra 21…………………………………………………………………
Muestra 22…………………………………………………………………
Muestra 23 …………………………………………………………………
Muestra 24…………………………………………………………………
Muestra 25…………………………………………………………………
Muestra 26…………………………………………………………………
Muestra 27…………………………………………………………………
Muestra 28…………………………………………………………………
Muestra 29…………………………………………………………………
Muestra 30…………………………………………………………………
Muestra 31…………………………………………………………………
Muestra 32…………………………………………………………………

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