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Manual de La Seccion

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INSTRUCCIONES PARA LA RECOGIDA DE MUESTRAS POR LOS PACIENTES.

PARA RECOGER ORINA DE 2 HORAS


Orinar a las 6 am en el baño y desechar esa orina; recoger toda la orina de las 2 horas
siguientes en una vasija ancha y verterlo con cuidado en el frasco. Traerlo al laboratorio
antes de las 10 am.

PARA RECOGER ORINA DE 8 HORAS.


Orinar a las 10 pm en el baño y desechar esa orina; recoger toda la orina de las 8 horas
siguientes (hasta las 6 am inclusive) en una vasija ancha y verterlo con cuidado en el
frasco.

PARA RECOGER ORINA DE 24 HORAS.


Orinar en el baño a las 6 am; recoger todas las orinas posteriores de ese día en una vasija
ancha y luego verterla con cuidado en los frascos, recoger también las orinas de la
madrugada y la de las 6 am del siguiente día inclusive.
PUESTO DE ADDIS:

Se organizan de forma consecutiva los addis por orden de llegada cada uno con su
identificación.
Se mide el volumen de cada muestra y se centrífuga 10 ml de orina en tubos plásticos
graduados.
Las ordenes organizadas se pasaran a las listas de trabajo que llevaran los siguientes
datos: nombre, numero, volumen, tiempo y los resultados de leucocitos, hematíes ,
cilindros y albúmina.

NEFROLOGÍA
Las orinas de 24 horas se mezclan, se miden y se le separa una alícuota en un tubo de
ensayo rotulado.
Las muestras se separan de acuerdo a la determinación que se le va a realizar.
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DEL SEDIMENTO URINARIO. CITURIA

1. Fundamento del método


La cuantificación de los elementos que componen el sedimento urinario
(eritrocitos, leucocitos y cilindros) combinado con la determinación de proteínas
en orina nos permite una valoración completa del funcionamiento renal.

2. Reactivos químicos y bioquímicos.


Ácido sulfosalicílico 0.786 mol/L (20 %)
Se pesan 20 gramos de ácido sulfosalicílico. Y se disuelven en 100 mL de agua.
Esta solución es estable a temperatura ambiente y envasada en frascos de color
ámbar que garantice un correcto cierre.

3. Aparatos, utensilios y medios de medición.


 Tubos para ensayo de 13 x 100 o 15 x 125 mL
 Gradillas para los tubos de ensayos
 Pipeta graduada de 5 mL; vD 0,1 mL
 Microscopio con lente objetivo 40 y poca luz
 Cámara de Newbauer
 Pipeta Pasteur
 Cubreobjetos

4. Muestra.
La muestra debe estar constituida por el chorro intermedio de la orina emitida
inmediatamente después de levantarse. En los análisis de urgencias puede
utilizarse la orina de emitida en cualquier momento del día o de la noche.

5. Procedimiento.
Consta de los parte una para la determinación de proteína o albúmina y otras para
el examen microscópico para el sedimento urinario.

a. Proteinuria (albuminuria)
Se determina cualitativamente el contenido de proteína en la muestra
añadiendo en un tubo de ensayo a 3 mL de orina 3 gotas de ácido
sulfosalicílico al 20 %.
Se informa de acuerdo a la turbiedad que aparezca como:

NO CONTIENE : Si se mantiene transparente


LIGERAS TRAZAS: Si aparece una ligera opalescencia.
TRAZAS: Si la turbiedad es mayor.
CONTIENE: Cuando se forma un precipitado blanco
(Proteinuria de mas de un 1 g/L)
b. Examen microscópico del sedimento urinario
El examen microscópico del sedimento urinario se realiza en una cámara
de Newbauer (figura 1) como se puede ver esta cámara tiene 9 cuadrados
de 1 mL de lado y 0,1 mL de altura.
La muestra se mezcla por rotación o se invierte suavemente para
resuspender os elementos sedimentados y con una pipeta Pasteur se carta
la cámara de Newbauer (Se cubre la cámara con un cubreobjeto y la orina
debe cubrir la zona cuadriculada de forma homogénea o sea el volumen
completo de la cámara), para que los elementos se sedimentes se coloca en
la platina del microscópico y se cuentan con el lente objetivo 40 y poca luz
los eritrocitos y leucocitos en 4 de los 16 cuadrados de los que esta
dividido cada mm2 de las esquinas de la cámara (los 4 cuadrados
superiores) Fig. 1 o sea en un área total de 1mm2. Los cilindros se cuentan
en el área total ocupada por los 4 mm2 de las esquinas (fig2).

1—1mm-- h 0.1mm
------------------------------------------- --------------------------------------
1 111213141 111213141 1 1 1 1
m 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 1
m 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
-------------------------------------------- -------------------------------------
1 1 1 1 1 1 1 1
1 1 1 1 1 1 1 1
1 1 1 1 1 1 1 1
1 1 1 1 1 1 1 1
-------------------------------------------- -------------------------------------
1 111213141 111213141 1 1 1 1
m 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 3 1 1 4 1
m 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
------------------------------------------- -------------------------------------
Fig. 1 Fig. 2
Cámara de Newbauer Cámara de Newbauer
Área enumerada (leucocitos y eritrocitos) Área enumerada (cilindros)

6. Método para los cálculos:


a. La cantidad de leucocitos y eritrocitos comprendidos en un mL de orina se
calcula de a siguiente manera (Bawer Pág.199):

N = Ne. (1mL / Vc) x dil.

Donde: Ne: Es la cantidad de eritrocitos y leucocitos contados en la cámara.


Vc: Es el volumen de la cámara en que se contaron las células.
Vc = 1mm2 x 0.1 mm = 0.1 mm3 = 0.0001 cm3 = 0.0001 mL
dil = 1
Entonces: N = Ne x 1 mL / 0.0001 mL x 1 = Ne x 10 000

N= Ne x 10 000

b. La cantidad de cilindros por mL de orina se calcula de la siguiente manera:

C = Ce ( 1mL / Vc) x dil.

Donde: Ce: Es la cantidad de cilindros contados en a cámara

Vc: Es el volumen de la cámara en que se contaron los cilindros

Vc: 4 mm2 x 0.1 mm = 0.4 mm3 = 0.0004 cm3 = 0.0004 mL

dil: Es 1 la muestra no se diluye

Entonces: C = Ce x 1 mL / 0.0004 mL x 1 = Ce x 2500

C = Ce x 2 500

Se informa los resultados de la siguiente manera:

ALBÚMINA: --------- No contiene


------------- x 10 000 LEUCOCITOS / mL
------------- x 10 000 ERITROCITOS / mL
------------- x 2 500 CILINDROS / mL

7. Control de la calidad

Se hacen duplicados algunas muestras al azar.

El resultado debe ser similar al de la muestra original.

8. Intervalo de referencia

ALBÚMINA : NO CONTIENE

0 a 10 000 LEUCOCITOS / mL
0 a 10 000 ERITROCITOS / mL
0 CILINDROS / mL

9. Bibliografía:

- Colina J. Laboratorio. Editora pueblo y Educación (1989)


- Davinsohn I. Y Henry J.B Diagnostico Clínico por el Laboratorio (1982)
- Bawer. Análisis clínicos. Métodos e interpretación (1984)
CONTEO DE ADDIS

1. Fundamento del método:

Esta prueba se basa en la cuantificación minutada, tanto de los elementos que


componen el sedimento urinario (eritrocitos, leucocitos y cilindros). Como de las
proteínas excretadas y se valora en orinas recogidas en 2 horas o en 8 horas; el
incremento de estos valores varia de acuerdo al tipo y la extensión de la lesión
renal correspondiente.

2. Reactivos químicos y bioquímicos:

 Para la proteinuria cualitativa:

Ácido sulfosalicílico 0.786 mol/L ( al 20 %) (Descrito en la cituria)

 Para la cuantificación de las proteínas urinarias:


Reactivos de azul de Comassie (Reactivo de proteínas)

En un matraz aforado de 1000 mL disolver 40 Mg. de azul de Comassie


Serva G en 40 ml de metanol; añadirle 100 mL de ácido fosfórico al 85 %
y aproximadamente 800 mL de agua destilada; añadir 30 Mg. de duodecil
sulfato de sodio y enrazar. Guardar en frasco de polietileno. protegido de
la luz y a temperatura ambiente Rotular reactivo de proteína

 Patrón de proteínas (Solución de proteínas)

En un matraz de 100 mL disolver 1 mL de boseral de 300 g/L con solución


salina hasta el enrace.
Se obtiene una solución de 3 g/L . Alicuotar en congelación (solución
matriz)

Solución de referencia: Disolver 50 L con 250 L de solución salina.


Concentración de 0.5 g/L.

3. Aparatos, utensilios y medios de medición.

 Tubos plásticos de 10 mL graduados de centrífuga


 Tubo para ensayo de 13 x 100 ó 15 x 125 mm
 Gradilla para los tubos de ensayos
 Pipetas graduadas de 10 mL ; vd 0.1 ,:
 Pipeta automática de 50L
 Cámara de Newbauer
 Cubre objeto
 Pipeta de Pasteur
 Microscopio con lente de objetivo 40 X y poca luz
 Foto colorímetro o espectrofotómetro para leer a una longitud de onda
entre 560 y 620 nm (preferiblemente de 580 nm)
 Cubeta de 1 mL de volumen y 1 cm de paso de luz.

4. Muestra:

a) Addis de 2 horas:
La muestra debe estar constituida por la orina de las dos primeras horas del
día preferentemente de reposo.
Método de recolección:
A las 6 am orinar para vaciar la vejiga. Marcar la hora y recoger toda la orina
de las 2 horas siguientes en una vasija ancha y verterlo con cuidado en el
frasco.

b) Addis de 8 horas:
La muestra debe estar constituida por la orina de las 8 últimas horas del
reposo nocturno.
Método de recolección:
A las 10 pm orinar para vaciar vejiga, marcar la hora y recoger toda la orina
de la madrugada hasta las 6 am inclusive, en una vasija ancha y verterlo con
cuidado en el frasco.

5. Procedimiento:
a) Medir diuresis y anotar el volumen.
b) Homogenizar la orina
c) Verter en un tubo de centrífuga graduado, 10 mL de la muestra, centrifugar
durante 5 minutos a 2000 rpm
d) Decantar a un tubo de ensayo previamente rotulado 9 mL del sobrenadante.
e) Resuspender el sedimento en el mL restante.
f) Examen microscópico del sedimento urinario

El examen microscópico del sedimento urinario se realiza en una cámara de


Neubawer (Fig.1). Esta cámara tiene 9 cuadrados de 1mm de lado y 0.1 mm de
altura.

Se agita el contenido del tubo para que sea homogéneo el sedimento


resuspendido. La cámara cubierta con un cubreobjetos que debe cubrir la zona
cuadriculada, se carga con una pipeta Pasteur de forma homogénea o sea el
volumen completo de la cámara. Se deja en reposos 3 minutos, para que los
elementos se sedimenten. Se coloca en la platina del microscopio y se cuentan con
el lente objetivo 40 y poca luz, los eritrocitos y leucocitos en 4 de los 16
cuadrantes de los que esta dividido cada mm2 de las esquinas de la cámara (los 4
cuadrados superiores de cada mm2 de las esquinas o sea en un área total de
1mm 2) Fig. 1.
Los cilindros se cuentan en el área total ocupado por los 4 mm2 de las esquinas.
Fig 2.
1—1mm-- h 0.1mm
------------------------------------------- --------------------------------------
1 111213141 111213141 1 1 1 1
m 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 1
m 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
-------------------------------------------- -------------------------------------
1 1 1 1 1 1 1 1
1 1 1 1 1 1 1 1
1 1 1 1 1 1 1 1
1 1 1 1 1 1 1 1
-------------------------------------------- -------------------------------------
1 111213141 111213141 1 1 1 1
m 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 3 1 1 4 1
m 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
------------------------------------------- -------------------------------------
Fig. 1 Fig. 2
Cámara de Newbauer Cámara de Newbauer
Área enumerada (leucocitos y eritrocitos) Área enumerada (cilindros)

g) Determinación de las proteínas urinarias:

Se determina cualitativamente el contenido de proteína en la muestra con los 9


mL de orina del sobrenadante decantado en el tubo enumerado, decantar 3 mL
a otro tubo y añadir 3 gotas de ácido sulfosalicílico al 20 %, se compara con el
tubo enumerado y se informa de acuerdo a la turbidez que aparezca:

NO CONTIENE: Si se mantiene transparente o si ambos tubos mantienen la


misma turbiedad.
LIGERAS TRAZAS: Si en el tubo con ácido aparece una ligera opalescencia.

Si la turbiedad es mayor se dosifican las proteínas por el método de azul de


Comassie. (Dosificación)
En un tubo de ensayo se vierten:

BLANCO MUESTRA REFERENCIA


Solución de referencia 50
Orina 50
Reactivo de proteínas 1mL 1mL 1mL

Se mezclan y se esperan 5 minutos. Leer contra blanco reactivo a 580nm, con una
cubeta de 1mL de volumen y 1 cm de paso de luz.
6. Gráfico de calibración

Se prepara distintas diluciones de la solución matriz para obtener 0.2; 0.5, 0.7 y
1.0 g/L. Este método es lineal solo hasta 1 g/L, que generalmente nos corresponde
con 0.4 de extinción; por eso a valores mayores de extinción debemos diluir la orina y
repetir la determinación con orina diluida y luego multiplicar el resultado por la dilución

7. Método para los cálculos:

a) Proteinuria

La concentración (C) de proteínas en la orina se calcula de siguiente manera:

D.O (orina)
C = --------------------------------- x C ( sol. Referencia) x dil.
D.O (solución referencia)

La concentración puede obtenerse también del grafico de calibración. Los resultados se


expresan en g/L

En el conteo de Addis se informa las proteínas en mg/min y se calcula de la siguiente


forma:

Diuresis (mL)
---------------------------- x C (g/L) = Proteínas excretadas / min
# de horas x 60 min

Diuresis (mL) g
---------------------------- x C ------------- = como g / 1000 = mg ; entonces
# de horas x 60 min 1000 mL

Diuresis (mL)
---------------------------- x C (mg / mL) = Proteínas (mg/min)
# de horas x 60 min

b) Cálculos del conteo del examen microscópico del sedimento (Bawer pag. 199)

N = Ne (1 mL / Vc) dil

Donde: Ne: Es la cantidad de eritrocitos y leucocitos contados en la cámara


Vc: Es el volumen de la cámara en que se contaron las células
Vc= 0.0001 mL
dil: Es la dilución la la orina en este caso es 1/10 ( resuspendimos en 1 mL el
sedimento de los 10 mL)
N= Ne x 1 mL / 0.0001 mL x 1 / 10

N= Ne x 10 000 x 1 / 10

N=Ne x 1 000

N: expresa # de células por mL.

En el conteo de Addis se informa la cantidad de células que se excretan por minuto


(Nm) y se calcula así:

Diuresis (mL)
--------------------------- x N ( # de células /mL) = Nm
# de horas x 60 min

Diuresis (mL)
--------------------------- x N = Nm ( # de células /min)
# de horas x 60 min

Entonces:
Diuresis (mL)
Nm (# de células / min) = Ne x 1000 x -------------------------
# de horas x 60 min

En el caso de los cilindros la cantidad excretada por mL de orina se calcula así:

C = Ce ( 1mL/Vc) x dil

Donde: Ce: Es la cantidad de cilindros contados en la cámara


Vc: Es el volumen de la cámara en que se contaron los cilindros (Fig 2)

Vc = 4 mm2 x 0.1 mm = 0.4 mm3 = 0.0004 cm3 = 0.000 4mL

Dil: Es 1 / 10

C = Ce x 2 500 x 1 / 10 C = Ce x 250 ( Cilindros / mL)

En el conteo de Addis se informan la cantidad de cilindros que se excretan por minuto


(Cm) y se calcula así:

Diuresis (mL)
--------------------------- x C ( # de cilindros / mL)
# de horas x 60 min

Diuresis (mL)
--------------------------- x C = Cm ( # de cilindros /min)
# de horas x 60 min
Entonces:
Diuresis (mL)
------------------------- x 250 x Ce = Cm ( # de cilindros / min)
# de horas x 60 min

Los resultados de Addis se informan de la siguiente manera:

Parámetros Resultados

Volumen ---------- mL
Leucocitos --------- / min
Hematíes --------- / min
Cilindros --------- / min
Proteinas --------- mg/ min

8. Control de la calidad:

Una muestra al azar se hace por duplicado.


El resultado debe ser similar al de la muestra original.

9. Intervalo de referencia

ADDIS DE 2 HORAS

VOLUMEN --------- ML
LEUCOCITOS 0 HASTA 1000 /MIN
HEMATÍES 0 HASTA 1000 / MIN
CILINDROS 0 HASTA 250 / MIN
PROTEÍNAS NO CONTIENE.
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE LAS PROTEINAS URINARIAS
(método de Marcart y Gerbaut descrito en 1984)

Método de azul de Comassie – SDS o método de Marcart

1. Fundamento del método.


Este método se basa en la reacción del azul de Comassie con los grupos que
componen el enlace peptídico de las proteínas formando un color azul con un máximo de
absorbancia en 580 nm

2. Reactivos químicos y bioquímicos.

Para la proteinuria cualitativa:


Ácido sulfosalicílico al 20 %

Para la cuantificación:
Reactivo de azul de Comassie (Reactivo de proteínas)

 Para la cuantificación de las proteínas urinarias:


Reactivos de azul de Comassie (Reactivo de proteínas)

En un matraz aforado de 1000 mL disolver 40 mg de azul de Comassie


Serva G en 40 ml de metanol; añadirle 100 mL de ácido fosfórico al 85 %
y aproximadamente 800 mL de agua destilada; añadir 30 mg de duodecil
sulfato de sodio y enrazar . Guardar en frasco de polietileno. protegido de
la luz y a temperatura ambiente Rotular reactivo de proteína

Patrón de proteínas (Solución matriz)


3. Aparatos, utensilios y medios de medición (igual que el anterior)

4. Muestra
Una alícuota de orina homogenizada de 24 horas

5. Procedimiento
a) Homogenizar la orina y medir diuresis
b) Guardar una alícuota de la orina rotulada
c) Determinar cualitativamente el contenido de la s proteínas de la alícuota
añadiendo en otro tubo 3 mL de orina con 3 gotas de ácido sulfosalicílico,
se compara con el tubo enumerado y se informa de acuerdo a la turbiedad
que aparezca.

Se informa:
NO CONTIENE: Si se mantiene transparente o si amos tubos mantienen la
misma turbiedad
LIGERAS TRAZAS: Si en el tubo con ácido aparece una ligera opalescencia.
Si la turbiedad es mayor se cuantifican las proteínas por el método de Azul de
Comassie.
Si el precipitado nos indica que la concentración de proteínas es mayor que
1g/L se diluye la orina antes de cuantificarla. Porque el método solo es lineal
hasta 1 g/L

En un tubo de ensayo se vierte:

BLANCO MUESTRA REFERENCIA


Sol. De referencia 50
orina 50
Reactivo de proteínas 1mL 1mL 1mL

Se mezclan y se esperan 5 minutos. Leer contra blanco reactivo a 580 nm, con una
cubeta de 1 mL de volumen y 1 cm de paso de luz.

6. Grafico de calibración:
La solución matriz de 1 g/L. Se enumeran tubos del 1 al 11 y se le añaden las
siguientes cantidades de solución de calibración para 2 mL del reactivo de Azul de
Comassie.

No Cantidad de Sol. Concentración D.O


(mL) (g/L)
1 0 0 0
2 0.01 0.1
3 0.02 0.2
4 0.03 0.3
5 0.04 0.4
6 0.05 0.5
7 0.06 0.6
8 0.07 0.7
9 0.08 0.8
10 0.09 0.9
11 0.10 1.0

Se leen los tubos contra el 1 que es el blanco reactivo en un espectrofotómetro a


580 nm.
Plotear las concentraciones vs las D.O. Es lineal hasta 1g/L.
Otra forma de hacer la curva de calibración:
De un patron de 50 g/L 1 ml a 50 ml con sol. Sal.
Con la solución matriz de 1 g/L se hacen 4 diluciones
Primer tubo 4 ml de sol. Sal. , punto cero, 0.000
Segundo tubo 1 ml de patron y 3 ml de sol. Sal., punto 1 0.250
Tercer tubo 2 ml de patron y 2 ml de sol. Sal. Punto 2 0.500
Cuarto tubo 3 ml de patron y 1 ml de sol. Sal. Punto 3 0.750
Quinto tubo 4 ml de sol. Sal. Punto 4 1 .000
Cada uno se trata como una muestra
Se leen los tubos contra el 1 que es el blanco reactivo en un espectrofotómetro a
580 nm.
Plotear las concentraciones vs las D.O. Es lineal hasta 1g/L.
7. Método para los cálculos:
La concentración C de proteína en orina se calcula mediante la formula siguiente:

Am
C = ----------- x Cr = factor * Am
Ar
donde factor = Cr / Ar o cotangente o pendiente
Am: Absorción de la muestra
Ar: Absorción de la solución de referencia
Cr: Concentración de a solución de referencia en g/L

La concentración también se puede obtener del gráfico de calibración.


Los resultados se expresan en g/L y se aproximan hasta las décimas.
Como esta prueba se realiza con orina de 24 horas los resultados se expresan en g/ 24
horas y se calculan así:
C X Vol. de 24 horas/ 1000 = Conc. de proteínas en g / 24 horas

8. Control de Calidad
Se controla la variación de los resultados con un material de control adecuado
(orina control).

9. Intervalo de referencia:
De 0 a 0.15 g/ 24 horas
DETERMINACIÓN DE PROTEINAS DE BENCE JONES
Método de Putman y col (1959)

1. Fundamento del Método:


La proteína de Bence Jones se caracteriza por la formación de un precipitado cuando
la orina es calentada de 50 a 60 C. Este precipitado desaparece total o parcialmente
cuando la temperatura se va acercando al punto de ebullición y reaparece al enfriarse.
Esta muy influenciada por la acidez y la concentración de las sales.

2. Reactivo químicos y bioquímicos:


 Acetato de sodio (anhidro) PM = 82.2 g/mol; solución 2 molar
 Pesar 16.406 g para 100 mL de agua destilada
 Disolver con un poco de agua y ajustar a pH 4.9 con ácido acético glacial
completar a 100 mL con agua.

3. Aparatos, utensilios y medios de medición


 Tubos de ensayo de 15 – 125 mm
 Gradillas
 Baño de Maria con termómetro

4. Muestras
La muestra esta constituida o por la primera orina de la mañana o por orina de 24
horas.

5. Procedimiento:
a. Colocar 4 mL de orina en un tubo de ensayo
b. Añadir 1 mL de buffer acetato 2 M, pH 4.9
c. Incubar en baño de agua a 56 C durante 15 min.
d. Cualquier precipitación es indicativa de presencia de proteínas de Bence Jones
en la orina.
e. Colocar en agua hirviendo 3 minutos y observa continuamente cualquier
disminución o aumento de precipitado; el aclaración de la opacidad es
confirmatorio, pero no todas se redisuelven a temperatura de ebullición.

6. Método para los cálculos:

Este es un método cualitativo donde el resultado es positivo si aparece el precipitado


a 56 C y negativo si no aparece precipitación a esa temperatura.

7. Control de Calidad
Se utiliza la orina de un paciente enfermo, un conocido positivo

8. Intervalo de referencia: Negativo


DETERMINACIÓN DEL FILTRADO GLOMERULAR
(Método de aclaramiento de la creatinina)

1. Fundamento del método:


La producción diaria de creatinina es igual a su excreción diaria por ser un producto
desechable del metabolismo muscular; la creatinina no se une a las proteínas, no es
metabolizada por el riñón, es fisiológicamente inerte, es filtrada libremente a nivel
glomerular y no es reabsorbida significativamente por los túbulos renales y por eso el
aclaramiento de la creatinina nos da la medida del filtrado glomerular.

2. Reactivos químicos y bioquímicos:


Reactivo para la determinación de creatinina (Hitachi)

3. Aparatos, utensilios y medios de medición


 Tubos de ensayo de 13 x 100 o 15 x 125 mm
 Gradilla
 Microdilutor para diluir las orina (1/20)
 Probetas de 2000 mL
 Autoanalizador discreto Hitachi

4. Muestra
La determinación necesita 2 muestras una de suero y otra de orina de 24 horas

5. Procedimiento:
Se homogeniza la orina de 24 horas, en una probeta y se mide la diuresis, luego se
rotula un tubo de ensayo y se conserva una alícuota de la orina.
En una planilla se enumeran los sueros de los pacientes que se les ha indicado filtrado
glomerular, y a continuación las orinas, las mismas se mandaran diluidas 1 en 20.
1 ml de agua destilada se le saca 50 µL y se le añaden 50 µL de la orina.
Todas las determinaciones se hacen en equipo Hitachi por el Jaffé cinético.

6. Método para los cálculos.


El filtrado glomerular se calcula por el aclaramiento de la creatinina.
La formula para el aclaramiento de la creatinina es la siguiente:

U crea ( mol /L) x 20 x Vol / min 1.73


FG = ------------------------------------------- x ----------- (mL/min)
P crea (mol /L) SC

Donde: Ucrea: - Concentración de creatinina en orina diluida


(Valor del Hitachi)
Pcrea: - Concentración de creatinina en plasma
Vol/min: - Volumen de orina de 24 horas / 1440 min
SC: - Superficie corporal del paciente.
L (0.725) x P (0.425) x 71.84
SC = ------------------------------------------ M 2
10000

L: Longitud del paciente en cm


P: Peso en Kg.
También se puede buscar en la tabla.
7. Control de calidad
Se controla la calidad de las determinaciones de creatinina

8. Intervalo de referencia: 70 – 160 mL/min.

Otro método para determinar FILTRADO


GLOMERULAR

Fórmula de Cockcroft y Gault para adultos.

Para el filtrado Si el peso lo dan en libras se divide entre 2.2


para que sean Kg. FG= ml/min

(140 – edad en años) * Peso (Kg) * FS (si Fem = 0.85)


FG =
0.818 * Creatinina en suero

FGt = FG * 1.73 / SC

FS = factor sexo, si es mujer = 0.85 y si es hombre = 1.


Filtrado Glomerular en niños.
Fórmula de Schwartz (1976)
FG / 1.73 m2 = K * L / Crea S (mg/dl), donde L = Talla en cm del
niño.
K=0.55 de 2 a 15 años y K = 0.45 < 2 años.

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