La coproculture est un examen des selles qui consiste à rechercher des bactéries causant des diarrhées. Le document décrit les indications, le prélèvement, les examens microbiologiques, la culture et l'interprétation des résultats de la coproculture.
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La coproculture est un examen des selles qui consiste à rechercher des bactéries causant des diarrhées. Le document décrit les indications, le prélèvement, les examens microbiologiques, la culture et l'interprétation des résultats de la coproculture.
La coproculture est un examen des selles qui consiste à rechercher des bactéries causant des diarrhées. Le document décrit les indications, le prélèvement, les examens microbiologiques, la culture et l'interprétation des résultats de la coproculture.
La coproculture est un examen des selles qui consiste à rechercher des bactéries causant des diarrhées. Le document décrit les indications, le prélèvement, les examens microbiologiques, la culture et l'interprétation des résultats de la coproculture.
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COPROCULTURE
Réalisée par: Hammadi Wala
DÉFINITION: Une coproculture est un examen des selles qui consiste à y rechercher la présence de bactéries. Elle permet de trouver la cause d’une diarrhée aiguë bactérienne et de mieux cibler le traitement antibiotique. Un examen parasitologique des selles peut aussi être effectué pour rechercher la présence de parasites. INDICATIONS: La coproculture est prescrite en cas de diarrhée aiguë évocatrice d’une infection bactérienne, en cas de : au moins trois selles molles ou liquides par jour depuis plus de 24 h et moins de 14 jours fièvre supérieure ou égale à 40 °C,
présence de glaire ou de sang dans les selles,
douleurs abdominales,
retour d’un voyage dans un pays où les diarrhées
bactériennes sont fréquentes (zone d’endémie) diarrhée survenant chez un patient hospitalisé (risque de diarrhée nosocomiale due à Clostridium difficile) toxi-infection alimentaire collective (TIAC). PRÉLVÈMENT: L’examen consiste à effectuer un petit prélèvement (environ 10 à 20 g) de selles. Le prélèvement s’effectue de préférence au laboratoire. Le patient transfère l’équivalent d’une noix de selles, à l’aide d’une spatule ou d’un flacon-cuillère, dans un pot stérile en privilégiant les éléments glaireux, sanglants ou d’aspect atypique. Chez le nourrisson et le petit enfant, on peut réaliser un écouvillonnage rectal. Afin d’éviter la dessiccation et la prolifération des bactéries et levures commensale, il faut analyser les selles dans les 2 heures qui suivent leur recueil. Sinon on peut les conserver 12 h maximum à 4°C.
Recueil des selles
EXAMEN MICROBIOLOGIQUE DES SELLES: Examen macroscopique des selles: Noter l'aspect de la selle : purulent, présence de mucus, présence de sang. Sa consistance : liquide, molle, moulée.
Examens microscopiques des selles:
État frais Faire une suspension homogène de la selle dans l’eau physiologique et examiner entre lame et lamelle à l’objectif X40. À ce propos, la dilution doit être suffisante pour apprécier la mobilité des bactéries mais pas trop forte sinon les recherches sont plus longues. Il permet : la recherche des leucocytes fécaux. Leur présence témoigne d’une inflammation du tube digestif et oriente vers une infection à microorganismes invasifs (Salmonella, Shigella, Yersinia, Campylobacter). En revanche, on n’en trouve pas dans le cas de diarrhées à microorganismes entérotoxiques ou à virus. de repérer des Vibrio et des Campylobacter grâce à leur mobilité par ciliature polaire en « vol de moucheron » de rechercher les hématies, les levures.
Il faut souligner que cet examen manque de sensibilité et
présente une valeur seulement s’il est positif. Dans le cas où des leucocytes, des hématies et des levures sont observés, il faut préciser leur nombre par champ. Frottis des selles coloré au Gram Il permet de : Evaluer le pourcentage des Gram + ou -.
Recherche les aspects caractéristiques tels que vibrio,
campylobacter… Cet examen permet de voire la flore équilibrée entre bactéries à Gram + et à Gram- ( environ 60% de bactéries gram- et 40% des bactéries gram + dans une selle normale ). CULTURE: La coproculture correspond à l’ensemencement de milieux généralement sélectifs pour isoler puis identifier l’agent infectieux. De plus en plus nombreux, les milieux chromogènes sélectifs de dernière génération ont grandement facilité le repérage des agents infectieux présents au sein d’une flore commensale riche et variée. À noter que pour certains germes la recherche se fait après une phase d’enrichissement. * Elle est orienté surtout pour la recherche de Salmonella et Shigella (entérobactéries). - JOUR 1 : A partir de bouillant d’ enrichissement on va préparer une suspension de selle . Cultiver 24h dans l’étuve à 37°C . - JOUR 2 : on ensemence avec la culture obtenue, un milieu d’isolement sélectif des Salmonella (SS, Hektoen, SM2 ou Rambach). LES MILIEUX D’ISOLEMENTS CLASSIQUES (CONVIENNENT POUR SALMONELLA ET SHIGELLA)
Ces milieux sélectifs inhibent totalement la culture des
Gram + et partiellement celle des Gram -. Les milieux les plus satisfaisants sont les suivants : milieu S.S (Salmonella – Shigella) : permet la croissance des Salmonella et plus difficilement celle des Shigella milieu Hektoen : milieu qui permet en particulier une très bonne culture des Shigella. Ce milieu contient trois glucides, ce qui augmente son caractère discriminant. Les Salmonella et les Shigella n’utilisent aucun de ces glucides. o Milieu Hektoën: C’est un milieu servant à une meilleur discrimination des bactéries surtout Salmonella , Shigella , Yersinia. Il contient 3 sucres: lactose , saccharose et salicine Indicateur coloré de PH : Bleu de Bromothymol et fushine acide . Milieu S.S: La gélose Salmonella Shigella (SS) est un milieu d’isolement sélectif, inhibant les bactéries à Gram positif et utilisé pour la recherche des Salmonella dans les selles. RÉSULTATS ET INTERPRÉTATION: Lorsque le médecin prescrit une coproculture standard, les agents pathogènes les plus fréquemment impliqués dans les diarrhées infectieuses sont recherchés de manière systématique, à savoir : Les bactéries des genres Salmonella et Shigella;
Les bactéries du genre Campylobacter;
La bactérie Yersinia enterocolitica.
Les techniques d’ensemencement, de culture et d’identification
des bactéries nécessitent un délai de 4 jours, avant de pouvoir obtenir l’ensemble des résultats. La recherche d’agents pathogènes responsables de diarrhées post-antibiotiques : Clostridium difficile, de loin le plus fréquent ; Klebsiella oxytoca; Clostridium perfringens; Staphylococcus aureus; Des levures (Candida). Résultat négative : ( pas des germes pathogènes)Absence de pousse bactérienne . Résultat positive : CONCLUSION La coproculture n’est positive que dans 0,5 à 14% des cas, car de nombreuses diarrhées sont virales mais aussi parce que l’examen n’est pas toujours facile à réaliser et à interpréter. MERCI POUR VOTRE ATTENTI.ON