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Coproculture

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COPROCULTURE

Réalisée par: Hammadi Wala


DÉFINITION:
 Une coproculture est un examen des selles qui consiste
à y rechercher la présence de bactéries. Elle permet de
trouver la cause d’une diarrhée aiguë bactérienne et
de mieux cibler le traitement antibiotique.
 Un examen parasitologique des selles peut aussi être
effectué pour rechercher la présence de parasites.
INDICATIONS:
La coproculture est prescrite en cas de diarrhée
aiguë évocatrice d’une infection bactérienne, en cas de :
 au moins trois selles molles ou liquides par jour depuis
plus de 24 h et moins de 14 jours
 fièvre supérieure ou égale à 40 °C,

 présence de glaire ou de sang dans les selles,

 douleurs abdominales,

 retour d’un voyage dans un pays où les diarrhées


bactériennes sont fréquentes (zone d’endémie)
 diarrhée survenant chez un patient hospitalisé (risque de
diarrhée nosocomiale due à Clostridium difficile)
 toxi-infection alimentaire collective (TIAC).
PRÉLVÈMENT:
 L’examen consiste à effectuer un petit prélèvement
(environ 10 à 20 g) de selles.
 Le prélèvement s’effectue de préférence au laboratoire.
Le patient transfère l’équivalent d’une noix de selles, à
l’aide d’une spatule ou d’un flacon-cuillère, dans un pot
stérile en privilégiant les éléments glaireux, sanglants ou
d’aspect atypique.
 Chez le nourrisson et le petit enfant, on peut réaliser un
écouvillonnage rectal.
 Afin d’éviter la dessiccation et la prolifération des
bactéries et levures commensale, il faut analyser les
selles dans les 2 heures qui suivent leur recueil. Sinon
on peut les conserver 12 h maximum à 4°C.

Recueil des selles


EXAMEN MICROBIOLOGIQUE DES
SELLES:
Examen macroscopique des selles:
 Noter l'aspect de la selle : purulent, présence de mucus,
présence de sang.
 Sa consistance : liquide, molle, moulée.

Examens microscopiques des selles:


État frais
 Faire une suspension homogène de la selle dans l’eau
physiologique et examiner entre lame et lamelle à
l’objectif X40. À ce propos, la dilution doit être
suffisante pour apprécier la mobilité des bactéries mais
pas trop forte sinon les recherches sont plus longues.
Il permet :
 la recherche des leucocytes fécaux. Leur présence témoigne
d’une inflammation du tube digestif et oriente vers une
infection à microorganismes invasifs
(Salmonella, Shigella, Yersinia, Campylobacter). En revanche,
on n’en trouve pas dans le cas de diarrhées à microorganismes
entérotoxiques ou à virus.
 de repérer des Vibrio et des Campylobacter grâce à leur
mobilité par ciliature polaire en « vol de moucheron »
 de rechercher les hématies, les levures.

 Il faut souligner que cet examen manque de sensibilité et


présente une valeur seulement s’il est positif.
Dans le cas où des leucocytes, des hématies et des levures
sont observés, il faut préciser leur nombre par champ.
Frottis des selles coloré au Gram
Il permet de :
 Evaluer le pourcentage des Gram + ou -.

 Recherche les aspects caractéristiques tels que vibrio,


campylobacter…
 Cet examen permet de voire la flore équilibrée entre bactéries à
Gram + et à Gram- ( environ 60% de bactéries gram- et 40%
des bactéries gram + dans une selle normale ).
CULTURE:
 La coproculture correspond à l’ensemencement de
milieux généralement sélectifs pour isoler puis identifier
l’agent infectieux. De plus en plus nombreux, les milieux
chromogènes sélectifs de dernière génération ont
grandement facilité le repérage des agents infectieux
présents au sein d’une flore commensale riche et variée.
 À noter que pour certains germes la recherche se fait
après une phase d’enrichissement.
* Elle est orienté surtout pour la recherche de Salmonella et Shigella
(entérobactéries).
- JOUR 1 : A partir de bouillant d’ enrichissement on va préparer une
suspension de selle . Cultiver 24h dans l’étuve à 37°C .
- JOUR 2 : on ensemence avec la culture obtenue, un milieu
d’isolement sélectif des Salmonella (SS, Hektoen, SM2 ou
Rambach).
LES MILIEUX D’ISOLEMENTS CLASSIQUES (CONVIENNENT
POUR SALMONELLA ET SHIGELLA)

Ces milieux sélectifs inhibent totalement la culture des


Gram + et partiellement celle des Gram -. Les milieux
les plus satisfaisants sont les suivants :
 milieu S.S (Salmonella – Shigella) : permet la
croissance des Salmonella et plus difficilement celle
des Shigella
 milieu Hektoen : milieu qui permet en particulier une
très bonne culture des Shigella. Ce milieu contient trois
glucides, ce qui augmente son caractère discriminant.
Les Salmonella et les Shigella n’utilisent aucun de ces
glucides.
o Milieu Hektoën:
C’est un milieu servant à une meilleur
discrimination des bactéries surtout
Salmonella , Shigella , Yersinia.
 Il contient 3 sucres: lactose , saccharose
et salicine Indicateur coloré de PH :
Bleu de Bromothymol et fushine acide .
 Milieu S.S:
La gélose Salmonella Shigella (SS) est un
milieu d’isolement sélectif, inhibant les
bactéries à Gram positif et utilisé pour
la recherche des Salmonella
dans les selles.
RÉSULTATS ET INTERPRÉTATION:
 Lorsque le médecin prescrit une coproculture standard, les
agents pathogènes les plus fréquemment impliqués dans
les diarrhées infectieuses sont recherchés de manière
systématique, à savoir :
 Les bactéries des genres Salmonella et Shigella;

 Les bactéries du genre Campylobacter;

 La bactérie Yersinia enterocolitica.

 Les techniques d’ensemencement, de culture et d’identification


des bactéries nécessitent un délai de 4 jours, avant de pouvoir
obtenir l’ensemble des résultats.
 La recherche d’agents pathogènes responsables
de diarrhées post-antibiotiques :
 Clostridium difficile, de loin le plus fréquent ;
 Klebsiella oxytoca;
 Clostridium perfringens;
 Staphylococcus aureus;
 Des levures (Candida).
 Résultat négative : ( pas des germes pathogènes)Absence de
pousse bactérienne .
 Résultat positive :
CONCLUSION
 La coproculture n’est positive que dans
0,5 à 14% des cas, car de nombreuses
diarrhées sont virales mais aussi parce que
l’examen n’est pas toujours facile à
réaliser et à interpréter.
MERCI POUR
VOTRE
ATTENTI.ON

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