Tubos Multiplos
Tubos Multiplos
Tubos Multiplos
ISSN: 0100-8307
cienciaenaturarevista@gmail.com
Universidade Federal de Santa Maria
Brasil
Hartwig Schwanke Peil, Greice; Vicentini Kuss, Anelise; Ferreira Gonçalves, Maria do
Carmo
Avaliação da qualidade bacteriológica da água utilizada para abastecimento público no
município de Pelotas-RS-Brasil
Ciência e Natura, vol. 37, núm. 1, enero-abril, 2015, pp. 79-84
Universidade Federal de Santa Maria
Santa Maria, Brasil
Resumo
A água é recurso natural indispensável à vida, e sua contaminação constitui um grande risco a saúde pública,
além de provocar diversos problemas ambientais. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a presença de
Pseudomonas aeruginosa, coliformes totais e Escherichia coli, na água de abastecimento público do município de
Pelotas-RS. Foram coletadas 12 amostras de água bruta e 12 de água tratada na Estação de Tratamento de Água
Santa Bárbara. A análise de P. aeruginosa foi realizada pela técnica de tubos múltiplos, e a detecção de coliformes
totais e E. coli, pelo método do substrato cromogênico (Fluorocult e Colilert). Das amostras de água bruta, 91,7%
revelaram crescimento de P. aeruginosa, E. coli, e 100% foram positivas para coliformes totais. As amostras de água
coletadas após o tratamento não apresentaram nenhum crescimento bacteriano. Os resultados obtidos indicam que
o sistema de tratamento foi eficaz na eliminação de bactérias indesejáveis e patogênicas. Portanto, a água tratada
distribuída em Pelotas atende aos parâmetros bacteriológicos estabelecidos pela legislação.
Abstract
Water is a natural resource essential for life and their contamination are a major risk to public health, in addition
to causing many environmental problems. This study aimed to evaluate the presence of Pseudomonas aeruginosa,
total coliforms and Escherichia coli, from water to public supply of the city of Pelotas/RS. Twelve samples of raw
water and twelve of treated water were collected at the Santa Barbara’s Water Treatment Station. Analysis for P.
aeruginosa was realized by multiple tube technique, and detection of total coliforms and E. coli was realized by
chromogenic substrate method (Fluorocult and Colilert). About raw water samples, 91.7 % indicated growth of P.
aeruginosa, E. coli, and 100 % of samples presented positive contamination by total coliforms. Samples of water
collected after the treatment did not show any bacterial growth. Results indicate that the treatment system was
effective to eliminate the undesirable and pathogenic bacterial. Therefore, the treated water distributed in Pelotas
complies with bacteriological parameters established by legislation.
Keywords: Water quality. Evaluation bacteriological. Pseudomonas aeruginosa. Total coliforms. Escherichia coli.
A
quanto ao padrão microbiológico, a água deve estar isenta
A água constitui um importante recurso natural, de coliformes totais e termotolerantes, inclusive E. coli, em
indispensável a manutenção da vida no planeta. amostras de 100 mL (BRASIL, 2011).
A quantidade e a qualidade da água potável estão O objetivo do trabalho foi avaliar a presença de Pseudomonas
diretamente relacionadas com a saúde humana, devido a sua aeruginosa, coliformes totais e Escherichia coli, em um
utilização para o consumo, higiene e produção de alimentos. reservatório de água e na respectiva estação de tratamento de
O monitoramento dos recursos hídricos é fundamental, pois água de distribuição pública no município de Pelotas-RS.
a poluição destes ambientes abrange uma série de fatores
como, presença de substâncias nocivas e tóxicas que levam a
alteração das características químicas, físicas e biológicas do 2 Materiais e Métodos
meio (CORADI et al., 2009).
Entre as principais fontes de contaminação estão o esgoto sem 2.1 Amostragem
tratamento, aterros sanitários, defensivos agrícolas, produtos
químicos e resíduos tóxicos que são depositados em ambientes Foram coletadas 12 amostras de água bruta e 12 de água
aquáticos (OKURA; SIQUEIRA, 2005). A crescente poluição tratada em frascos de vidro de 100 mL, a cada sete dias durante
e a contaminação dos mananciais resultam na transmissão de 70 dias. As coletas de água foram realizadas na Estação de
muitos agentes infecciosos, causadores de doenças diarreicas, Tratamento de Água (ETA) Santa Bárbara, município de
responsáveis por um elevado número de mortes nos países em Pelotas, localizada aproximadamente a 3 Km da área urbana.
desenvolvimento, incluindo o Brasil (OLIVEIRA et al., 2012). Esta ETA foi construída para complementar o abastecimento
Entre as principais doenças originadas pela água contaminada de água potável da cidade, utilizando as águas da barragem
estão, a cólera, febre tifóide, leptospirose e giardíase (SANTOS construída a partir do fechamento do Arroio Santa Bárbara
et al., 2013), e os agentes biológicos de maior importância são (SANEP, 2014). Segundo o Serviço Autônomo de Saneamento
as bactérias, protozoários, vírus e os helmintos, provenientes de Pelotas (SANEP) a ETA têm a capacidade total de 40
principalmente de contaminação fecal humana e animal, em milhões de litros diários, responsável pelo abastecimento de
águas destinadas ao consumo (CARDOSO et al., 2007). diversos pontos da cidade como, Centro, Zona do Porto, Bairro
A Organização Mundial de Saúde (OMS) estabeleceu Navegantes, Vila Fátima, Bairro Fragata, Distrito Industrial
alguns critérios para qualidade da água potável, dentre elas, e Vila COHAB.
avaliação microbiológica quanto a presença de bactérias O Departamento de Tratamento do SANEP realiza o
indicadoras de contaminação fecal, pela contagem de bactérias tratamento da água bruta para consumo através do método
do grupo coliformes. Porém, outras bactérias podem estar convencional, que consiste nas etapas de coagulação e
presentes em águas de abastecimento, muitas patogênicas e floculação, decantação, filtração, desinfecção, fluoretação e
multirresistentes, como do gênero Pseudomonas, encontradas neutralização do pH.
no solo, na água e matéria orgânica em decomposição e podem
ser isoladas da pele, garganta e fezes de pessoas doentes. A 2.2 Análise de Pseudomonas aeruginosa
espécie P. aeruginosa é um importante patógeno oportunista
e apresenta resistência à diversos antibióticos (CORRÊA et A pesquisa de P. aeruginosa foi realizada através do
al., 2013). método de tubos múltiplos, descrito por Silva et al. (2005),
A presença de coliformes totais e de coliformes termotolerantes sendo inoculados 10 mL de amostra em 10 tubos contendo
em ambiente aquático indica contaminação fecal da água e 10mL de Caldo Asparagina em dupla concentração. Após a
risco da presença de organismos patogênicos, responsáveis pela incubação a 37°C por 48 horas, foi realizada a confirmação
transmissão das principais doenças infecciosas. No grupo de de tubos positivos através do desenvolvimento de coloração
coliformes termotolerantes, a principal espécie é a Escherichia esverdeada, confirmada pelo aparecimento de fluorescência
coli, que ocorre exclusivamente no trato intestinal do homem quando submetidos a luz ultravioleta em câmara escura. Os
e animais homeotérmicos (OKURA; SIQUEIRA, 2005). tubos positivos foram repicados para placas contendo Ágar
Sendo considerada como indicador de qualidade da água, com Cetrimide, meio específico para P. aeruginosa, e incubadas a
maior especificidade para avaliar contaminação fecal recente 37°C por 48 horas. Através da leitura em tabela NMP (Número
e indicar a possível ocorrência de bactérias patogênicas no Mais Provável), o resultado obtido indicou a quantidade de
ambiente (SILVA et al., 2005). P. aeruginosa para 100 mL de amostra. As colônias típicas
No Brasil a Portaria nº 2.914 de 12 de dezembro de 2011 (brancas ou esverdeadas) foram repicadas para placas com
do Ministério da Saúde estabelece as normas sobre o padrão Ágar Leite e incubadas a 37°C por 48 horas. O crescimento de
de potabilidade e qualidade da água para consumo humano, colônias esverdeadas e aparecimento de halo claro em torno da
onde são apresentados valores máximos permitidos para colônia, resultado da hidrólise da caseína, confirma a presença
as características microbiológicas, organolépticas, físicas e de P. aeruginosa.
químicas. A água potável é definida como: “água apropriada
para o consumo humano e cujos indicadores biológicos, 2.3 Análise de coliformes totais e Escherichia coli
microbiológicos, físicos, químicos e radioativos, atendem ao As análises de coliformes totais e E. coli foram realizadas pelo
81 Peil et al.: Avaliação da qualidade bacteriológica da água utilizada para...
método do substrato cromogênico, segundo APHA (1998). exceto em uma amostra, que apresentou 1300 NMP/100 mL
Para amostras de água bruta, a determinação foi realizada -1
de água bruta.
pela técnica de tubos múltiplos, utilizando meio de cultura Na primeira coleta de água houve um maior índice de
comercial Fluorocult®. Foram transferidos 1mL, 0,1 mL e contaminação por coliformes totais e E. coli (7900 e 1300
0,01 mL de amostra em 5 tubos de ensaio nas diluições 100, NMP/100 mL -1, respectivamente) enquanto P. aeruginosa
10-1 e 10-2, respectivamente, e foram incubados a 37°C por apresentou um baixo índice. Neste caso, não foi observado
24 horas. Após, foi realizada a contagem de tubos positivos, uma relação entre a contagem de coliformes totais e E. coli
os quais atingiram a coloração verde-azulada, em cada uma com P. aeruginosa, visto que a maior contaminação por P.
das diluições. Para E. coli foi realizada a contagem, sendo aeruginosa foi detectado nas coletas 6 e 9.
considerado como positivo, os tubos que apresentaram A contagem de P. aeruginosa realizada na água bruta pode ser
fluorescência azulada no caldo, observados sob luz ultravioleta visualizada na Figura 1.
em câmara escura. Os resultados para coliformes totais e
E. coli foram descritos através da leitura em tabela NMP, 8
informando a quantidade de cada grupo bacteriano em 100
mL de água. 6
Para água tratada, foi utilizado meio de cultura comercial
NMP/100ML
Colilert®. Foi realizada a diluição de um sachê em 100 mL
4
de amostra, incubou-se por 24 horas a 37°C. Os tubos que
apresentaram coloração amarela escura, foram considerados
positivos na avaliação de coliformes totais e aqueles que 2
apresentaram fluorescência azulada sob luz ultravioleta,
revelaram presença de E. coli. 0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Coletas
3 Resultados e Discussão
Figura 1: Contagem de Pseudomonas aeruginosa na
3.1 Análise bacteriológica da água bruta água bruta utilizada para abastecimento do município
Na tabela 1. podem ser visualizados os resultados obtidos na de Pelotas, RS.
avaliação das 12 amostras de água bruta. Foi constatada a
presença de P. aeruginosa em 11 amostras, apresentando entre A bactéria P. aeruginosa pode ser observada em água com
1,1 e 6,9 NMP/100 mL-1 de água, correspondendo a 91,7% baixos níveis de sólidos dissolvidos e compostos orgânicos,
das amostras. Na avaliação quanto a presença de coliformes evidenciando sua habilidade adaptativa aos ambientes com
totais, todas as amostras se apresentaram positivas, variando baixa disponibilidade de nutrientes (GUERRA et al., 2006).
de 170 a 7900 NMP/100 mL-1 de água. No caso da presença Sendo patogênica e com propriedades de resistência, faz
de E. coli, foram observadas 11 amostras positivas (91,7% das com que seja uma das principais bactérias causadoras de
amostras), variando entre 20 e 330 NMP/100 mL-1 de água, infecções hospitalares (SADER et al., 2001). Estas infecções
Tabela 1: Avaliação bacteriológica da água bruta captada na Estação de Tratamento de Água de Pelotas – RS.
acometem diversos sítios do corpo humano de pacientes 90%, daquelas coletadas respectivamente nos mesmos locais,
imunocomprometidos (FUENTEFRIA et al., 2008). O sistema durante período de seca, não estavam em conformidade com os
respiratório é o mais frequente, levando ao desenvolvimento padrões microbiológicos de potabilidade, caracterizando fator
de pneumonia, também provoca infecções do trato urinário de risco à população.
e corrente sanguínea, entres outras (FERRAREZE et al., Okura e Siqueira (2005) analisaram amostras de água de minas
2007). Apesar dos riscos que essa bactéria apresenta à (sem tratamento), e como resultado, em 99,67% das águas foi
saúde, a legislação atual não apresenta parâmetro algum detectado a presença de coliformes totais e termotolerantes,
para P. aeruginosa, referente a água in natura e a água evidenciando que as águas estavam impróprias para o consumo
tratada destinada ao consumo humano. Somente para a humano. Moura et al. (2009) avaliaram a qualidade da água
água engarrafada, a espécie é apresentada como parâmetro, de oito minas utilizadas pela população de Uberaba (MG), e
na Resolução n° 275, de 22 de setembro de 2005 da Agência constataram que 75% delas apresentaram-se impróprias para
Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA, 2005). consumo, principalmente pela presença de coliformes fecais.
A água bruta captada na ETA de Pelotas apresentou má Santos et al. (2010) avaliaram a qualidade microbiológica da
qualidade, segundo as análises microbiológicas, devido água em dois mananciais que abastecem Goiânia (GO), antes
a presença das bactérias. Sendo assim, verificou-se que a e após o tratamento em ETAs municipais. Como resultado um
água utilizada para o abastecimento da população, antes do dos rios apresentou maior nível de contaminação fecal, porém
tratamento, está contaminada. Essa contaminação se confirma a água tratada apresentou qualidade satisfatória, não sendo
através da verificação do alto percentual (91,7%) de amostras detectados coliformes ou Salmonella spp, em ambos locais.
positivas para P. aeruginosa e E. coli, bem como 100% das
amostras positivas para coliformes totais. Segundo Amaral 3.2 Análise bacteriológica da água tratada
et al. (2003) a contaminação dos ecossistemas aquáticos
superficiais está diretamente relacionada com os poluentes Entre as alíquotas de água tratada não foi detectada
carreados pelo deflúvio superficial. Poluentes ou substâncias nenhuma das bactérias avaliadas, atendendo os parâmetros
que podem modificar as características físico-químicas e microbiológicos estabelecidos pela legislação. A qualidade
biológicas, inclusive microbiológicas, alterando a qualidade da água é determinada segundo especificações do Ministério
dos mananciais. da Saúde, que estabelece como padrão de potabilidade para
Os resultados revelam uma baixa contagem de P. aeruginosa e água destinada ao consumo humano, a ausência de bactérias
E. coli em relação aos coliformes totais. O grupo de coliformes dos grupos coliformes totais e E. coli em 100 mL de água.
totais inclui bactérias de origem entérica e ambiental. Tanto os Portanto, quanto ao parâmetro microbiológico, a água tratada
coliformes totais quanto a E. coli, pertencente aos coliformes do município de Pelotas pode ser considerada própria para o
termotolerantes, indicam contaminação fecal do ambiente. consumo humano e sem riscos à saúde da população.
A maioria das bactérias pertencentes ao grupo de coliformes Segundo a OMS, a ausência dos coliformes totais constitui um
termotolerantes incluem os gêneros Escherichia, Enterobacter, indicador adequado e suficiente na avaliação da eficiência do
Citrobacter e Klebsiella, além de outros (SILVA et al., 2005). tratamento, visto que eles apresentam uma taxa de decaimento
Estes são causadores de doenças e E. coli é similar ou superior à dos coliformes termotolerantes, incluindo
indicadora de risco da presença de outros micro-organismos a E. coli. A ausência da bactéria E. coli na água tratada,
patogênicos. A bactéria E. coli, apresenta alguns sorotipos indica que não há contaminação fecal, nem outros patógenos.
causadores de gastroenterites, que provocam diarreia Portanto o processo de tratamento empregado em Pelotas
(CORDEIRO et al., 2004). levou a destruição e/ou remoção das bactérias avaliadas.
Apesar dos insatisfatórios resultados bacteriológicos da água Segundo a Portaria nº 2.914/2011, além do padrão
bruta, conforme a Resolução 357/05 do Ministério da Saúde, a microbiológico, a água para ser considerada potável deve
água coletada pode ser classificada como classe I. Neste estudo, atender aos padrões de: turbidez para água pós-filtração
segundo a tabela 1, as amostras que revelaram contagem de E. ou pré-desinfecção, substâncias químicas que representam
coli acima do limite atingiram um percentual de 41,67%, o que risco à saúde, cianotoxinas na água, radioatividade, padrão
permite classificá-la em classe I. Nesta classe, a contagem de organoléptico, monitoramento de cianobactérias no manancial
coliformes termotolerantes ou de E. Coli não deve ultrapassar de abastecimento.
de 200 UFC/100 mL de água amostrada. Apesar dos resultados satisfatórios para água tratada, deve
Os resultados obtidos neste estudo são semelhantes a, outros ser realizado um monitoramento constante desta água na
estudos, que confirmam que água in natura, sem o devido ETA, bem como avaliar a qualidade da água que chega ao
tratamento, pode apresentar altos níveis de micro-organismos consumidor. Visto que do tratamento ao consumo, uma
perigosos à saúde humana. O estudo de Amaral et al. (2003) série de fatores pode comprometer a qualidade dessa água
na região Nordeste de São Paulo, avaliou 180 amostras de tratada. Dentre os fatores podem-se destacar as condições
água utilizada para consumo, quanto a presença de coliformes de segurança dos reservatórios de distribuição, a falta de
totais, E. coli e número de micro-organismos mesófilos, em manutenção na rede de distribuição (vazamentos, limpeza
30 propriedades rurais. Como resultado, 90% das amostras de e descarga periódica), a intermitência do abastecimento que
água das fontes, 90% dos reservatórios e 96,7% de consumo pode gerar riscos de contaminação na rede e as condições de
humano, coletadas em período chuvoso, e 83,3%, 96,7% e armazenamento domiciliar da água.
83 Peil et al.: Avaliação da qualidade bacteriológica da água utilizada para...
Resultados semelhantes a este estudo são descritos na literatura. Regulamento técnico de características microbiológicas
Bettega et al. (2006) constataram a ausência de coliformes para água mineral natural e água natural. Diário
totais e fecais em amostra de água após o tratamento realizado Oficial da União, 23 set. 2005.
pela Companhia de Saneamento do Paraná (SANEPAR)
Curitiba-PR. Cruz et al. (2009) avaliaram 15 amostras de ALVES, N. C.; ODORIZZI, A. C.; GOULART, F. C. Análise
água em estabelecimentos da educação infantil da rede pública microbiológica de águas minerais e de água potável de
do Gama (DF), todas próprias para o consumo, ausentes abastecimento, Marília, SP. Revista de Saúde Pública,
de coliformes termotolerantes. Entretanto, outros estudos São Paulo, v. 36, n. 6, p. 749-751, 2002.
realizados em diferentes regiões do País não apresentam um
tratamento considerado eficiente para águas de abastecimento. AMARAL, L. A.; FILHO, N. A.; ROSSI JR., O. D.;
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desenvolvido por D’ Aguila et al. (2000) revelou que 61% rurais. Revista de Saúde Pública, São Paulo, v. 37, n.
das amostras de água tratada apresentaram coliformes e P. 4, p. 510-514, 2003.
aeruginosa, evidenciando que 61,51% dos pontos coletados
estavam contaminados, indicando que o tratamento da água American Public Health Association (APHA). Standard
não foi eficaz. Alves et al. (2002) analisaram 18 amostras de Methods for The Examination of Water and
água de abastecimento, obtidas na área urbana e de diferentes Wastewater. 20ª ed. Washington, 1998.
localidades do município de Marília (SP), e constataram a
presença de coliformes. BETTEGA, J. M. P. R.; MACHADO, M. R.; PRESIBELLA,
Guerra et al. (2006) analisaram 413 amostras de água M.; BANISKI, G.; BARBOSA, C. A. Métodos analíticos
potável do sistema principal e do sistema secundário em no controle microbiológico da água para consumo
Bandeirantes (PR). Destas, 10,41% estavam contaminadas humano. Ciência e Agrotecnologia, Lavras, v. 30, n.
por P. aeruginosa, incluindo 23,53% das amostras do sistema 5, p. 950-954, 2006.
de água secundário, e 8,56% das amostras do sistema de água
principal, porém nenhuma amostra apresentou contagem BRASIL. Portaria nº 2.914 de 12 de Dezembro de 2011.
de bactérias do grupo coliforme. O estudo de Cardoso et al. Dispõe sobre os procedimentos de controle e de
(2007) em Salvador (Bahia), com amostras de água coletadas vigilância da qualidade da água para consumo humano
em 83 escolas, revelou que 41% das amostras apresentaram e seu padrão de potabilidade. Diário Oficial da União.
contaminação por coliformes totais e termotolerantes, sendo 12 dez. 2011.
essa água imprópria para o consumo.
Siqueira et al. (2010) avaliaram a qualidade bacteriológica CARDOSO, R. C. V.; ALMEIDA, R. C. C.; GUIMARÃES,
de 40 amostras de água de consumo, em diferentes unidades A. G.; GOES, J. A. W.; SILVA, A. S.; SANTANA, A. A.
de alimentação de Recife (PE), e como resultado 62,5% das C.; HUTTNER, L. B.; VIDAL JR., P. O.; FIGUEIREDO,
amostras apresentaram contaminação por coliformes totais e K. V. N. A. Qualidade da água utilizada em escolas
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