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COPROCULTIVO

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COPROCULTIVO

COPROCULTIVO
Se colocan heces fecales con solución salina fisiológica,
donde si encontramos leucocitos PMN hay infección
bacteriana. Sangre= ulcera o destrucción de tejido.
Levaduras= no es normal encontrarlas y tiene que ver con su
• EXAMEN DIRECTO. sistema inmunológico

• Preparación húmeda con SSF que permite ver presencia de


leucocitos (PMN), hematíes, parásitos o levaduras.
• PARA INFECCIONES CAUSADAS POR BACTERIAS (DISTINTAS A LOS
BACILOS GRAMNEGATIVOS). Como algún staphilococcus, Campylobacter, Vibrio (forma de coma

• EN DIARREA PROVOCADA POR COLERA O POR ROTAVUIRUS, NO SE


OBSERVAN LEUCOCITOS.

LA TINCIÓN DE GRAM NO TIENE VALOR DIAGNÓSTICO


Porque mucho de los microorganismos se ven igual
La técnica de siembra para el agotamiento del
inoculo: Se hace la descarga y después se hacen
mas estrías en toda la caja. Sin quemar el asa
CULTIVOS porque se puede morir la salmonella o shigella si
están presentes

• TECNICA DIRECTA:
• De las heces directamente, se siembra en los medios de cultivo
selectivos diferenciales .
Ventaja: ahorro de 24
• AGAR EMB (Eosina Azul de Metileno) hrs de análisis.
• AGAR MAC (Mac Conkey) La desventaja es que
aquí no se esta
• AGAR SB (Sulfito de Bismuto)
seleccionando a ningún
• AGAR SS (Salmonella Shigella) microorganismo, es
• AGAR TCBS (Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa) decir, todas las
enterobacterias crecen
en el EMB y Mac
Conkey.
De la muestra se toma alrededor de 1 mL de
heces y se pasa a diferentes medios de
enriquecimiento selectivo, el cual sirve para
aumentar la cantidad de los patógenos
seleccionándolos a partir de una muestra que

CULTIVOS tiene muchas enterobacterias.


Ya que al momento de pasar a medios de enriquecimiento
selectivo lo que se hace es eliminar al resto de
enterobacterias, pero si hay Salmonellas, Shigella o Vibrio
se hace que se reproduzcan para verlas (con una colonia
se considera positivo el cultivo.
• TECNICA INDIRECTA.
• Se siembran medios de enriquecimiento selectivo:
• CT: CALDO TETRATIONATO: Medio para Salmonella a partir de heces, orina,
alimentos y otras muestras de importancia clínica.
• CS: CALDO SELENITO: Medio especifico para Shigella a partir de heces.
• APA: AGUA PEPTONADA ALCALINA: Medio utilizado para Vibrio sp. Se incuba
de 6 a 8 horas a 37°C
TECNICA INDIRECTA

• Después del crecimiento en los medios líquidos, se siembra


en los siguientes medios:
• AGAR EMB (Eosina Azul de Metileno)
• AGAR MAC (Mac Conkey)
• AGAR SB (Sulfito de Bismuto)
Como este medio al único
• AGAR SS (Salmonella Shigella) que no aisla es a Vibrio, no
es necesario que del caldo
• AGAR TCBS (Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa) Tetrationato y del caldo
Selenito se pase a este
medio
Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa

AGAR TCBS

En el TCBS Agar, el extracto de levadura y la peptona proporcionan el nitrógeno y las


vitaminas. El citrato sódico, el tiosulfato sódico, la bilis de buey y el colato son
agentes selectivos que proporcionan un pH alcalino para inhibir los organismos gram
positivos y suprimir los organismos coliformes. Microorganismos intestinales
El pH del medio se incrementa para favorecer el crecimiento de Vibrio cholerae porque
este organismo es sensible a los entornos ácidos. La alta concentración de sodio
favorece el crecimiento de Vibrio cholerae que es halotolerante y de otras especies de
Vibrio, cuya mayoría es halofílica (conc. de sal altas). La sacarosa es un
carbohidrato fermentable, y el cloruro sódico estimula el crecimiento y para dar un
ambiente osmótico adecuado. El tiosulfato sódico es una fuente de azufre y actúa
con el citrato férrico como indicador para detectar la producción de ácido sulfhídrico. El
azul de bromotimol y el azul de timol son indicadores de pH.
A pH alcalinos el color del medio de cultivo es verde (intenso)
pH acidos el color es amarillo
¿Qué es lo que estamos buscando?

• EMB: Colonias incoloras (Salmonella y Shigella)


• MAC: Colonias incoloras (Salmonella y Shigella)
• SB: Colonias negras con precipitado negro (Salmonella)
• SS: Colonias translucidas con precipitado negro (Salmonella)
• SS: Colonias translúcidas (Shigella)
• TCBS: Colonias amarillas (Vibrio)
Agar SS
No produjo precipitado negro.
Es una Shigella.

Agar sulfito de bismuto


Agar Salmonella-shigella Colonias como ojo de pescado (transparente
Salmonella por su precipitado negro alrededor), negras con precipitado. Es Salmonella.

Colonias No
fermentadoras. fermentadoras.
Es E. coli Es una
Salmonella

Agar SS.
Hay precipitado negro. Es Salmonella No tiene coloración. Es una Shigella
No Fermenta, no es el patógeno que se busca, se
Fermenta la Sacarosa y son colonias amarillas considera negativa
PRUEBAS BIOQUÍMICAS PARA
Ya que se hizo la identificación y se tienen las colonias en los medios
selectivos y diferenciales se hacen las pruebas bioquímicas

• BASICAS:
• TSI
• LIA
• UREA
TSI LIA
FAD Citrato

Salmonella Descarboxilación de
Positivo
Precipitado Negativo.
lisina positiva, todo Urea
negro, no se el medio se ve
fermenta lactosa
negativo
morado. En la
ni sacarosa, pero picadura se ve
si glucosa negro y es el H2S
Citrato TSI Descarboxilación
FAD
Descarboxilación negativo de la lisina
negativo No hay
es positiva y no fermentación negativo
tiene movimiento de lactosa y
sacarosa y no
tiene H2S

Shigella
fermentación
de glucosa
Fermentación Descarboxilaci
Citrato Urea
de glucosa ón de la lisina
negativo positiva poca, no de es positiva
lactosa y
sacarosa

Vibrio
Examen macroscópico Aspecto, color, consistencia

Sin mucha importancia clínica. Observación


de leucocitos, hematíes, parásitos, levaduras.
Examen microscópico
Microorganismos como Staphylococcus y
levaduras

• Caldo tetrationato (Salmonella)


Técnica indirecta • Caldo Selenito (Shigella)
• Agua peptonada alcalina (Vibrio cholerae)

• Siembra por agotamiento


• EMB: Enterobacterias lactosa
negativas, Pseudomonas (Bacilos Pruebas
bioquímicas
Técnica directa gramnegativos), Levaduras. para
• Agar SB: Salmonella identificación
• Agar SS: Salmonella y Shigella
• Agar TCBS: Vibrio

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