FUNDAMENTOS DO

METABOLISMO DE FÁRMACOS

Flavio da Silva Emery

Química Farmacêutica Medicinal
 Bibliografia

BARREIRO, E. J., FRAGA, C. A. M. “Química Medicinal: as bases

moleculares da ação dos fármacos”, Artmed Editora, 2001.
Cap. 1: “Aspectos gerais da ação dos fármacos”, p. 35-51.

SILVERMAN, R. B. “The organic chemistry of drug design and drug action”,

Academic Press, 2004, 2nd Ed.
Cap. 7: “Drug metabolism” p. 405-495.

WERMUTH, C. G. (ed.) “The practice of medicinal chemistry”, Elsevier

Academic Press, 2003, 2nd Ed.
Cap. 31: J. Magdalou, S. Fournel-Gigleux, B. Testa, M. Ouzzine.
“Biotransformation reactions” p.517-543.
Cap. 32: “Chemical mechanisms of toxicity: basic knowledge for designing
safer drugs” p. 545-560.

WILLIAMS, D. A., LEMKE, T. L. (Eds). “Foye´s Principles of Medicinal

Chemistry” Lippincott Williams & Wilkins, 2002, 5th Ed.
Cap. 8: D. A. Williams “Drug metabolism” p. 174-233.
Organismo invasor
Produção de anticorpos

Produção de enzimas

CH 3

OH

1-THC COOR
R= O COO-
OR OH
H OH
O C5H11 HO
H
-glucuronil

Pequenas moléculas O C5H11

Porque uma substância química deve ser metabolizada?

Quem realiza a metabolização?

 Compostos estranhos ao organismo
XENOBIÓTICOS
(geralmente lipofílicos)

Enzimas não específicas

Fígado, rins,
Princípio geral do pulmões,
metabolismo trato gastrointestinal
fígado
Compostos hidrofílicos

Eliminação (urina)

Fármaco inativo  metabólito ativo (bioativação)

Fármaco ativo  metabólito ativo (mesma atividade, toxicidade)

Fármaco ativo  metabólito inativo (bioinativação)

 O

N O
NH
O O

TALIDOMIDA
Década de 60

• Indicada para redução do

desconforto matinal em
gestantes

• nascimento de 12.000
crianças com deformações
congênitas

• R - sedativo / analgésico

• S - metabólitos eletrofílicos
reagem com nucleófilos
orgânicos
(teratogenicidade)
 O estudo do metabolismo dos fármacos permite:
• estabelecer a cinética de formação e as estruturas químicas dos metabólitos;

• determinar a velocidade e o sítio de absorção majoritário;

• determinar os níveis de concentração e depósito plasmático e tissular do

fármaco e metabólitos (estabelecimento da meia vida média);

• determinar a principal via de eliminação;

• determinar os sítios moleculares vulneráveis metabolicamente;

• compreender as interações metabólicas entre fármacos administrados

simultaneamente;

• determinar a toxicidade dos metabólitos e correlacioná-la com a estrutura

química;

• fornecer novos protótipos com atividades farmacológicas distintas

• bioativação de pró-fármacos
 Fatores que afetam o metabolismo:

Genéticos:
diferenças de expressão das enzimas de metabolização
(ex: maior sensibilidade de japoneses e chineses ao etanol)

Fisiológicos:
metabolismo prejudicado em pessoas muito jovens e idosos
• diferenças sexuais, gravidez,
• doenças (especialmente hepáticas), estado nutricional

Farmacodinâmicos:
dose, posologia, via de administração, depósito tecidual,
ligação a proteínas plasmáticas

Ambientais:
competição metabólica entre fármacos e xenobióticos
Quais as principais reações
metabólicas?
oxidação
Biotransformação redução
(fase I) hidrólise

Reações metabólicas

Conjugação Glicuronidação
glutationa
(fase II) Sulfatação
glicina
acetilação
metilação
 Metabolismo Fase I
O N O N
H H
OH OH

(i) Oxidação OH
Propranolol
Hidroxilação alifática ou aromática
(-blocker)
N-, or S-oxidação OH

N-, O-, S-dealquilação N NH N NH

NH2 NH2

Debrisoquine
(anti-hypertensive)
(ii) Redução
H O H O
N N
Redução de Nitro a hidroxilamina/ amina
N
Redução de carbonila ao álcool O2 N H2N N

Nitrazepam
(iii) Hidrólise (hypnotic)
Ester ou amida ao ácido/álcol e amina CO2 H CO2 H

Hidrazidas ao ácido e hidrazina substituída O OH

Aspirin
(Analgesic)
 Phase II Metabolism
O CHCl2
O CHCl2
(i) Glicuronidação HN
OH HN CO2H
O O
OH
Ácido carboxílico, alcool, fenol, amina OH
OH
HO
HO

O2 N
O2 N

(ii) Amino ácidos Chloramphenicol

(antibiotic)
Ácidos carboxílicos

(iii) Acetilação
Aminas N N
O O
H H
OH OH

(iv) Sulfatação
OH O O
S
álcool, fenol, amina Prenalterol HO O

(-blocker)
(v) Conjugação glutationa (gly-cys-glu)
Compostos halogenados, epóxidos, óxidos de areno, quinona-
iminas
 Reações da Fase I do metabolismo

Reações oxidativas:
Citocromo P450,
Flavina monooxigenase (FMO),
desidrogenases,
-oxidases,

enzimas microssomais hepáticas

Processos microssomais de biotransformação
 Complexo enzimático citocromo P450

Enzimas ligadas às membranas (oxidases de função mista):

• flavoproteína – NADPH-CYP450 redutase – carreador de elétrons

do NADPH para CYP450
• proteína heme – citocromo P450 – sítio de ligação e ativação do O2
e sítio de ligação do substrato

Ambas contém flavina mononucleotídeo (FMN) e flavina

dinucleotídeo (FAD)

• associadas a lipídeos (fosfatidilcolina) – manutenção do ambiente

negativamente carregado

17 isoformas de CYP450
Isoformas humanas do CYP450 expressas no fígado

2E1 – 7% 3A4/5 - 34%

2D6 – 3%
2C – 19%

2B6 – 1%
2A6 – 4%

1A2 – 13% Isoformas que não metabolizam

fármacos – 19%

Oxidam substâncias endógenas (esteróides,

ácidos biliares, vitaminas lipossolúveis, etc.)
 2C18/19 – 8%
2D6 – 21%

2C8/9 – 17%

2E1 – 4%

1A1 – 3%

3A4/5 – 36%
Metabolização de fámacos clinicamente importantes
 Metabolismo oxidativo da cafeína
O
CH3
H3C N
N

N N
O

CH3

cafeína

CYP450 3A
CYP450 1A2

O
CH3
O
CH3 H3C N
N
H3C N OH
N
N N
O
N N
O CH3
H

Ácido 1,3,7-trimetilúrico
paraxantina
CYP450
 PROTOFORFIRINA FÉRRICA IX

N
3+
N Fe N

N
HOOC

HOOC
 Deslocamento de 1
R
elétron do anel HIDROXILAÇÃO AROMÁTICA
aromático

O H
H R
N N
R
FeIV
O
N N
O N N
S N N FeIII Deslocamento
FeIV N N [1,2] de
N N hidreto
S
S
N N

N N

FeIII

H O R
R

O H
H
H

SILVERMAN, R. B.“The organic chemistry of drug design

and drug action”, Academic Press, 2004, 2nd Ed. HO R
Cap. 7: “Drug metabolism” p. 405-495.
M. R. Wester et al. J. Biol. Chem. 2004, 279, 35630.
PDB ID 1R9O – CYP450 2C9 (2.0Å)
 R R

Possíveis reações com óxidos de areno

H B

H
O O H
H+

R R R

nucleófilos
rearranjo macromoleculares
H
O OH

OH H
X

glutationa S-transferase
GSH
epóxido hidrolase
H2O

R R

OH OH

OH SG
 Exemplos de reações que podem ocorrer com o óxido de areno:
• abertura do epóxido catalisada por hidrolase

Benzopireno
diol
regiosseletividade

• abertura do epóxido catalisada biomacromoléculas

O

N
NH

O N N NH
O
O P O HO
DNA O
O-

HO O HO

OH OH
GUANINA DESOXINUCLEOTÍDEO
 Dois anéis aromáticos

Anel mais ativado – mais rico em elétrons

diclofenaco

COO-Na+

NH

Cl Cl
 Anéis aromáticos desativados
(grupos retiradores de elétrons: -Cl, -N+R3, -COOH, -SO2NHR)
Geralmente mais resistentes à hidroxilação

COOH Cl
Cl-
HN
+
N
H
(H3CH2CH2C)2NO 2S N
H

probenecid Cl
cloreto de clonidina
(anti-hipertensivo)
Dois anéis aromáticos
Hidroxilação ocorre no anel mais rico em elétrons
H O
N S

Cl N
N Cl

clorpromazima N
(antipsicótico)
diazepam
(anticonvulsivante)
Anéis aromáticos desativados de poluentes ambientais resistentes à
oxidação aromática:

alta lipofilicidade e baixa metabolização (persistência no organismo)

Cl O Cl

Cl O Cl Clm Cln
2,3,7,8-tetraclorodibenzo-p-dioxina misturas de bifenil policlorados
 CARCINOGENICIDADE DA AFLATOXINA

O O
O O

O O
O
H H
CYP450
O O

H O OCH3 H O OCH3
DNA
AFLATOXINA

H2N N N O
O
OH
HN
N O
H
O
O

H O OCH3
Oxidação de carbonos benzílicos

Posição benzílica
 Oxidação de carbonos benzílicos

OH
H3C H2C
O O

N N

N CH3 N CH3

metaqualona 2-hidroximetaqualona
 Oxidação de carbonos alílicos

OH

HO N
HO N

H3CO H3CO

N N

quinidina 3-hidroxiquinidina

HO
OH

N N
N
+

HO HO
HO
CH3 CH3
CH3

pentazocina Metabólito trans Metabólito cis

Oxidação de carbonos  à carbonilas (C=O) e iminas (C=N)

H3C H3C
O O
N N

OH
N N
Cl Cl

diazepam 3-hidroxidiazepam
 Oxidação em carbonos alifáticos e alicíclicos

OH
R

 oxidação
R
OH

R
-1 oxidação

O O

HN HN OH

O N O O N O
H H

amobarbital
Exemplos de reações oxidativas da fase 1 do metabolismo catalisadas pelo
CYP450 – N,S,O-desalquilações

N N

CH 3
N N
H
imipramina CH 3 desimipramina

N N
CH 3 CH 3

O OH O OH
H3CO HO
codeína morfina

H3C
S SH
H H
N N
N N

N N N
N
6-metilmercaptopurina 6-mercaptopurina
Metabolismo da papaverina
 Exemplos de reações oxidativas da fase 1 do metabolismo de
hidrocarbonetos alifáticos e alicíclicos catalisadas pelo CYP450

O O
O O O O
S S
N N N N
H H H H

H3C
Tolbutamida
OH
Oxidação metílica

COOH COOH COOH

OH
OH

Ibuprofen
Oxidação da cadeia alquílica lateral
 Exemplos de reações oxidativas da fase 1 do metabolismo de
hidrocarbonetos alifáticos e alicíclicos catalisadas pelo CYP450

O
O

N CH 3
H O N CH3
H
Fenmetrazina
Oxidação de anel heterocíclico

O O

OH OH

Ácido valpróico
desidrogenação
 Exemplos de reações oxidativas da fase 1 do metabolismo de alcenos
catalisadas pelo CYP450
Epoxidação de ligação dupla O

N N

CH 3 CH 3

cicloeptadina

O HO OH

CYP450 epóxido hidrolase

Abertura estereosseletiva
O NH2 O NH2 do epóxido
O NH2
CARBAMAZEPINA
Exemplos de reações oxidativas da fase 1 do metabolismo de compostos
aromáticos catalisadas pelo CYP450

O O

HN HN

ACETANILIDA
OH
ACETAMINOFENO

OH

NH NH
O O
N O N O
H H
FENITOÍNA
 N- e S-oxidações catalisadas por flavina monooxigenase (FMO)

FMO – mecanismo distinto do CYP450

Catalisa oxidação dos heteroátomos N e S, mas não promove desalquilações

N – secundários, terciários, ciclícos, arilaminas, hidroxilaminas, hidrazinas

Aminas terciárias acíclicas e cíclicas para N-óxidos

Aminas secundárias acíclicas e cíclicas para hidroxilaminas e nitronas

N-alquil e N,N-dialquilaril aminas para hidroxilaminas

Tióis, dissulfetos e tioéteres para sulfonas e sulfóxidos

 Ciclo catalítico da FMO hepática
R R

H3C N N O H3C N N O

NH NH
H3C N H3C N
H
O O

H+ O O

H H O
H2O

NH2

NADPH
N

R
R
R
H3C N N O
H3C N N O

NH
H3C N NH
H3C N
OH H
H O O
O O
B
PRODUTO
SUBSTRATO R H H B
OXIDADO
Exemplos de reações oxidativas da fase 1 do metabolismo catalisadas pela
flavina monooxigenase (FMO) – compostos nitrogenados

Aminas terciárias acíclicas e cíclicas para N-óxidos

R1 O R1
R3 N + Enz FAD OOH R3 N + Enz FAD OH
R2 R2

CH 3 N
N

N
CLORPROMAZINA
OH
N

CH3
N
ATROPINA O
NICOTINA
 Aminas secundárias acíclicas e cíclicas para hidroxilaminas e nitronas
R1 R1 R1
O
H N + Enz FAD OOH HO N + Enz FAD OOH N
R2 R2 O R2

Enz FAD OH Enz FAD OH

N-alquil e N,N-dialquilaril aminas para hidroxilaminas

R R
H N + Enz FAD OOH HO N
Ar Ar

Enz FAD OH

Hidrazinas 1,1-dissubstituídas
R1 R1
H2N N + Enz FAD OOH H2N N O
R2 R2

Enz FAD OH
Exemplos de reações oxidativas da fase 1 do metabolismo catalisadas pela
flavina monooxigenase (FMO) – compostos com enxofre

Tióis e dissulfetos
O

R SH R S S R R S S R

Tioéteres
O O
R1 S R2 R1 S R2 R1 S R2

O
SULFÓXIDO SULFONA

Me
H H
N N
S Me
HN
N N
CN
cimetidina sulindaco
 Oxidações não microssomais

Oxidações de álcoois – álcool desidrogenase / NAD

H OH O

OH O

Oxidações de aldeídos – aldeído desidrogenase / NAD

H OH

O O

Oxidações de bases purínicas – xantina oxidase e xantina desidrogenase

SH SH
H H
N N
N N

N HO N N
N
6-MERCAPTOPURINA ÁCIDO 6-MERCAPTOÚRICO
 Desaminação oxidativa de aminas

Monoamino oxidase (MAO) e diamino oxidase (DAO)

R NH2 + O2 R NH R O + NH4+
Reações redutivas: NADPH-citocromo C redutase
 Reações hidrolíticas: ésteres e amidas

enzimas plasmáticas, hepáticas, renais, outros tecidos

NH2 NH2 O
H H HO
N S N S S
esterase + O
O N O N O N
O O
O O
O
O O O OH O
S
SULTAMICILINA O SULBACTAMA
O N

NH2
O
H
N S

O N
O
OH
AMPICILINA O
FÁRMACOS COLINÉRGICOS E ANTICOLINÉRGICOS: ação de esterases

Agonistas muscarínicos

O CH 3 O CH 3 CH 3
CH 3 CH 3
N N
H3C O CH 3 H2N O CH 3
acetilcolina
betanecol

Antagonistas nicotínicos

O
N
N N O
O N

O
decametônio
succinilcolina
 Fase II - Reações de conjugação

Excreção na
urina ou na bile

Efeito de primeira passagem – presença de funções lábeis na estrutura do

fármaco, que permitem que o mesmo sofra reação de fase II diretamente,
diminuindo sua meia-vida
 Conjugação com sulfato

1. ATP-sulfurilase
SO4-2 + ATP 3-fosfoadenosina-5´-fosfossulfato + ADP + PPi
2. APS - fosfoquinase
(PAPS)

H2N

N
N

O N
N

O3SO P O R sulfotransferase R
O
+
OH OSO3
OH

OPO3H2 OH

(PAPS)
 Conjugação com ácido glucurônico
O
COO
O
R-OH OH
OH N
HO

O O O N

O P O P O
O

O O

OH OH

UDP – glucuronato
Ácido glucurônico uridina difosfato – UDPGA
COO forma do ácido glucurônico ativada
O
OH
RO OH
HO
 Conjugação com glutationa (GSH)

NH 2
Cys NH 2
H
H N
N E S COOH
HS COOH
glutationa O
E + Glu
O S-transferase HN O
substrato HN O
eletrofílico aduto de glutationa
HOOC
HOOC Gly

-glutamil
transpeptidase
Glu

O
NH 2
CoA acetil CoA
Gly E S
NH NH 2
E S E S

N-acetilase cisteinil HN O
HO O HO O glicinase

derivado ácido mercaptúrico HOOC